オルムチニブは、ETS1過剰発現白血病細胞におけるドキソルビシン耐性を逆転させます

バックグラウンド薬耐性は、ドキソルビシン（DOX）による白血病の治療における大きな問題であり、赤血球芽細胞症ウイルスE26癌遺伝子相同性1（ETS1）遺伝子は薬剤耐性に関連しています。オルムチニブは、がん細胞の多剤耐性（MDR）の逆転に役割を果たすことが報告されている第3世代の表皮成長因子受容体（EGFR）チロシンキナーゼ阻害剤（TKI）です。この研究の目的は、オルムチニブがETS1を過剰発現する白血病細胞のDOX耐性を逆転させることができるかどうかを調査することでした1。材料と方法ヒト慢性骨髄性白血病細胞株K562およびそのDOX耐性細胞株K562/ADRが使用されました。ウエスタンブロットとQPCRは、ETS1とABCB1の発現を検出しました。細胞の増殖は、細胞カウントキット8およびチアゾリルテトラゾリウムによって測定されました。細胞アポトーシスは、ウエスタンブロットとフローサイトメトリーによって観察されました。ヌードマウスK562/ADR異種移植モデルを使用して、in vivoの腫瘍成長に対するオルムチニブの阻害効果を調査しました。結果ETS1およびABCB1のmRNAおよびタンパク質発現は、DOX耐性白血病細胞株K562/ADRでアップレギュレートされました。両方の細胞株でETS1を過剰発現し、オルムチニブが濃度依存的にK562およびK562/ADRの細胞生存率を阻害したことがわかりました。K562/ADR細胞をEST1過剰発現するDOXの細胞毒性は、オルムチニブによって強化されました。オルムチニブはまた、DOX治療のみと比較して、K562およびK562/ADR細胞のアポトーシスを促進しました。in vivoでは、オルムチニブは、K562/ADR細胞異種移植片成長のETS1過剰発現に対するDOXの阻害効果を高めました。結論我々の結果は、新規EGFR TKIオルムチニブがETS1過剰発現白血病細胞のDOXへの感受性を高めることを示唆しています。

BACKGROUND Drug resistance is a major problem in the treatment of leukemia with doxorubicin (Dox), and the erythroblastosis virus E26 oncogene homolog 1 (ETS1) gene is associated with drug resistance. Olmutinib is a third-generation epidermal growth factor receptor (EGFR) tyrosine kinase inhibitor (TKI) reported to play a role in reversing multidrug resistance (MDR) in cancer cells. The objective of this study was to investigate whether olmutinib could reverse Dox resistance in leukemia cells overexpressing ETS1. MATERIAL AND METHODS Human chronic myelogenous leukemia cell line K562 and its Dox-resistant cell line K562/ADR were used. Western blot and qPCR detected the expression of ETS1 and ABCB1. Cell proliferation was measured by cell counting kit-8 and methyl thiazolyl tetrazolium. Cell apoptosis was observed by western blot and flow cytometry. A nude mice K562/ADR xenograft model was used to investigate the inhibitory effects of olmutinib on tumor growth in vivo. RESULTS The mRNA and protein expressions of ETS1 and ABCB1 were up-regulated in Dox-resistant leukemia cell line K562/ADR. We overexpressed ETS1 in both cell lines, finding that olmutinib inhibited the cell viability of K562 and K562/ADR in a concentration-dependent manner. The cytotoxicity of Dox to EST1-overexpressing K562/ADR cells was enhanced by olmutinib. Olmutinib also promoted apoptosis of K562 and K562/ADR cells compared with Dox treatment alone. In vivo, olmutinib enhanced the inhibitory effects of Dox on ETS1-overexpressing K562/ADR cell xenograft growth. CONCLUSIONS Our results suggest that the novel EGFR TKI olmutinib enhances the sensitivity of ETS1-overexpressing leukemia cells to Dox.