酵母におけるRas関連Ypt1遺伝子産物の温度感受性変異体の研究は、細胞内カルシウムの調節における役割を示唆しています

YPT1ILE121変異遺伝子の支配的致死表現型を温度依存的に抑制する、遺伝子内変異を分離しました。単一点突然変異に起因するさまざまなアミノ酸置換のうち、2、ALA161 ----- VAL（A161V）およびMET165 ---- ILE（M165I）は、YPT1ILE121変異タンパク質の機能を回復しました。YPT1ILE121/VAL161対立遺伝子（YPT1TS）のみを発現する変異体は、温度で通常30度Cで成長しましたが、37度Cで停止しました。細胞骨格欠陥と強化された45CA2+取り込み。YPT1枯渇細胞でも同様の変化が見られました。YPT1TS変異細胞は、細胞外Ca2+を増加させることにより成長停止から救助される可能性があり、寛容な温度でさえ、トリフルオペラジンの感受性の増加を示しました。

Intragenic mutations were isolated that suppressed the dominant-lethal phenotype of the YPT1ile121 mutant gene in a temperature-dependent fashion. Among different amino acid substitutions resulting from single point mutations, two, Ala161----Val (A161V) and Met165----Ile (M165I), restored the function of the YPT1ile121 mutant protein. Mutants expressing the YPT1ile121/val161 allele (ypt1ts) only, grew normally at temperatures up to 30 degrees C but were arrested at 37 degrees C. At the restrictive temperature, ypt1ts mutants accumulated ER membranes, small vesicles, and unprocessed invertase, and they exhibited cytoskeletal defects and an enhanced 45Ca2+ uptake. Similar alterations were seen in YPT1-depleted cells. The ypt1ts mutant cells could be rescued from growth arrest by increasing extracellular Ca2+, and, even at the permissive temperature, they displayed increased trifluoperazine sensitivity.