運動失調症候群のRFC1遺伝子におけるペンタヌクレオチドの繰り返し拡大の臨床スペクトル

目的：他の患者患者の患者の患者において、後期発症性脳運動失調、神経障害、および静脈内発症性脳軟骨症候群（カンバス）の患者における複製因子Cサブユニット1（RFC1）をコードする遺伝子におけるイントロニックバイアレン性ペンタヌクレオチド繰り返し拡大の臨床的有意性を決定する。、および包括的な遺伝的分析による健康的なコントロールで。 方法：この症例対照研究では、完全または不完全なキャンバスを持つ26人の患者、遅発性大脳性運動失調症の70人の患者、208人の健康な対照患者、および運動失調を決定するために運動失調を決定するために39人の多世代家族の153人を含む457人の個人が含まれていました。96人の患者全員が、二重PCRにより繰り返し拡大するためにスクリーニングされました。繰り返しの種類と長さをさらに特徴付けるために、フラグメント長分析、繰り返しプライミングされたPCR、サンガーシーケンス、およびサザンブロッティングを使用しました。RFC1および隣接遺伝子WDR19の発現は、定量的PCRによって決定されました。 結果：完全なキャンバス（88％）の15/17人の患者（88％）、不完全なキャンバスの2/9患者（22％）、不特定の遅発性小脳性運動失調症の4/70人の患者（6％）で大規模な二連ペンタヌクレオチド拡大が見つかりました（6％）、しかし、コントロールではありません。患者では、拡大は800〜1,000で構成されていましたが、ほとんどがAagggリピートを繰り返します。非流行的に拡張された繰り返し数は、7-137のリピートの範囲で、伝送中は比較的安定していました。RFC1とWDR19の発現は変更されておらず、RFC1イントロン保持は見つかりませんでした。 結論：バイアレン性ペンタヌクレオチドの繰り返し拡大は、キャンバスの頻繁な原因であり、かなりの数の患者に臨床症状が不完全または他の形態の小脳運動失調を抱えていることがわかります。繰り返し拡張が病気を引き起こしているメカニズムは不明のままであり、さらなる調査を保証します。

OBJECTIVE: To determine the clinical significance of an intronic biallelic pentanucleotide repeat expansion in the gene encoding replication factor C subunit 1 (RFC1) in patients with late-onset cerebellar ataxia, neuropathy, and vestibular areflexia syndrome (CANVAS), in patients with other ataxias, and in healthy controls by comprehensive genetic analyses. METHODS: In this case-control study, we included 457 individuals comprising 26 patients with complete or incomplete CANVAS, 70 patients with late-onset cerebellar ataxia, 208 healthy controls, and 153 individuals from 39 multigenerational families without ataxia to determine repeat stability. All 96 patients were screened for the repeat expansion by duplex PCR. To further characterize the repeat type and lengths, we used fragment length analysis, repeat-primed PCR, Sanger sequencing, and Southern blotting. Expression of RFC1 and the neighboring gene WDR19 were determined by quantitative PCR. RESULTS: Massive biallelic pentanucleotide expansions were found in 15/17 patients with complete CANVAS (88%), in 2/9 patients with incomplete CANVAS (22%), in 4/70 patients with unspecified, late-onset cerebellar ataxia (6%), but not in controls. In patients, the expansion comprised 800-1,000 mostly AAGGG repeats. Nonmassively expanded repeat numbers were in the range of 7-137 repeats and relatively stable during transmission. Expression of RFC1 and WDR19 were unchanged and RFC1 intron retention was not found. CONCLUSIONS: A biallelic pentanucleotide repeat expansion is a frequent cause of CANVAS and found in a considerable number of patients with an incomplete clinical presentation or other forms of cerebellar ataxia. The mechanism by which the repeat expansions are causing disease remains unclear and warrants further investigations.