大腸菌のDNAポリメラーゼIIIは、UVおよびメタンスルホン酸エチルの変異誘発に必要です

DNAポリメラーゼIIIの制限温度（43度C）でPCBA1変異、機能的DNAポリメラーゼI、およびDNAポリメラーゼIIIの温度感受性変異を有する大腸菌の株の株。UV光またはメタンスルホン酸エチルへの曝露後のこのような株の細菌ゲノムの変異速度は、そのリファンピシン耐性またはアミノ酸要件によって測定されました。さらに、前照射されたラムダファージのワイグル突然変異誘発も測定されました。すべての場合において、DNAポリメラーゼIIIの制限温度では、突然変異誘発の増加は認められませんでした。クローン化されたDNAポリメラーゼIII遺伝子の導入により、細菌ゲノムの突然変異率と43度Cでのワイグル突然変異誘発が正常に戻りました。RECA-LACZ融合を使用して、UV照射後のSOS応答を測定し、正常であることがわかりました。Lambda Prophageの誘導と同様に、DNAポリメラーゼIIIの制限的および許容温度。再結合はどちらの温度でも正常でした。我々の研究は、SOS誘導以外のステップでの変異誘発に機能的なDNAポリメラーゼIIIが厳密に必要であることを示しています。

Strains of Escherichia coli possessing the pcbA1 mutation, a functional DNA polymerase I, and a temperature-sensitive mutation in DNA polymerase III can survive at the restrictive temperature (43 degrees C) for DNA polymerase III. The mutation rate of the bacterial genome of such strains after exposure to either UV light or ethyl methanesulfonate was measured by its rifampicin resistance or amino acid requirements. In addition, Weigle mutagenesis of preirradiated lambda phage was also measured. In all cases, no increase in mutagenesis was noted at the restrictive temperature for DNA polymerase III. Introduction of a cloned DNA polymerase III gene returned the mutation rate of the bacterial genome as well as the Weigle mutagenesis to normal at 43 degrees C. Using a recA-lacZ fusion, the SOS response after UV irradiation was measured and found to be normal at the restrictive and permissive temperature for DNA polymerase III, as was induction of lambda prophage. Recombination was also normal at either temperature. Our studies demonstrate that a functional DNA polymerase III is strictly required for mutagenesis at a step other than SOS induction.