酵母におけるH1様ヒストンの存在に関する免疫学的証拠

酵母におけるヒストンH1の存在に関する論争を考慮して、過塩素酸と塩で抽出された酵母タンパク質を研究することにより、問題を再調査しました。細胞全体からの過塩素酸抽出タンパク質には、SDSと酸尿素ゲルの両方で「本物の」酵母高モビリティグループ（HMG）と共調する2つの画分のみが含まれています。これらの抽出物は、抗（子牛胸腺HMG）抗血清とかなりの交差反応を示し、マウス肝臓H1に対して抗血清と反応しません。標準的な塩/トリクロロ酢酸処置による「本物の」酵母HMGの分離は、異なる数のタンパク質バンドを含む2種類の製剤を提供します。より低い準備は抗HMG抗血清とのみ反応しますが、より豊富な準備は抗H1抗血清とかなりの反応をもたらします。塩吸収タンパク質で実行された免疫ブロッティング分析は、抗H1抗血清との陽性免疫反応を与える3つのタンパク質バンドの存在を明らかにします。免疫反応性バンドは、マーカーカーフ胸腺H1のそれに近い電気泳動移動度を持ち、他の著者が発見した推定酵母H1画分の移動度に似ています。

In view of the controversies about the existence of histone H1 in yeast we have reinvestigated the problem by studying yeast proteins extracted with perchloric acid and salt. Perchloric-acid-extracted proteins from whole cells contain only two fractions which comigrate with 'authentic' yeast high-mobility-group proteins (HMG) in both SDS and acid urea gels. These extracts show a considerable cross-reaction with anti-(calf thymus HMG) antiserum and do not react with antiserum to mouse liver H1. The isolation of 'authentic' yeast HMG by the standard salt/trichloroacetic acid procedure gives two types of preparations containing different numbers of protein bands. The poorer preparation reacts only with the anti-HMG antiserum whereas the richer preparation also gives considerable cross-reaction with the anti-H1 antiserum. Immunoblotting analysis performed on the salt-extracted proteins reveals the presence of three protein bands giving positive immunoreaction with the anti-H1 antiserum. The immunoreactive bands have electrophoretic mobilities close to that of the marker calf thymus H1 and similar to the mobilities of the presumptive yeast H1 fractions found by other authors.