Furin阻害剤はSARS-COV-2スパイクタンパク質切断をブロックして、ウイルスの産生と細胞障害の効果を抑制します

特定の抗ウイルス剤の開発は、SARSコロナウイルス2（SARS-COV-2）感染に対する緊急の満たされていないニーズです。この研究は、抗ウイルス標的としてアンジオテンシン変換酵素2（ACE2）に結合した後の融合に重要なSARS-COV-2スパイクタンパク質をタンパク質に活性化する宿主プロテアーゼに焦点を当てています。最初に、SARS-COV-2スパイクの推定フーリン基質モチーフでの切断をVero6細胞で発現させ、顕著なシンシチウム形成を見つけます。切断およびシンシチウムは、フリン阻害剤デカノイル-RVKR-クロロメチルケトン（CMK）およびナフトフルオレセインによる治療により廃止されますが、膜貫通プロテアーゼセリン2（TMPRSS2）阻害剤カモスタットによるものではありません。CMKおよびナフトフルオレセインは、ウイルスの産生および細胞障害効果を低下させることにより、SARS-COV-2感染細胞に抗ウイルス効果を示します。さらなる分析により、Camostatと同様に、CMKはウイルスの侵入をブロックすることが明らかになりましたが、スパイクとSyncytiumの切断をさらに抑制します。ナフソフルオレセインは、主にウイルスRNA転写を抑制することにより作用します。したがって、フリン阻害剤は、SARS-COV-2感染の予防と治療のために抗ウイルス剤を有望である可能性があります。

Development of specific antiviral agents is an urgent unmet need for SARS-coronavirus 2 (SARS-CoV-2) infection. This study focuses on host proteases that proteolytically activate the SARS-CoV-2 spike protein, critical for its fusion after binding to angiotensin-converting enzyme 2 (ACE2), as antiviral targets. We first validate cleavage at a putative furin substrate motif at SARS-CoV-2 spikes by expressing it in VeroE6 cells and find prominent syncytium formation. Cleavage and the syncytium are abolished by treatment with the furin inhibitors decanoyl-RVKR-chloromethylketone (CMK) and naphthofluorescein, but not by the transmembrane protease serine 2 (TMPRSS2) inhibitor camostat. CMK and naphthofluorescein show antiviral effects on SARS-CoV-2-infected cells by decreasing virus production and cytopathic effects. Further analysis reveals that, similar to camostat, CMK blocks virus entry, but it further suppresses cleavage of spikes and the syncytium. Naphthofluorescein acts primarily by suppressing viral RNA transcription. Therefore, furin inhibitors may be promising antiviral agents for prevention and treatment of SARS-CoV-2 infection.