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SYTO 9は、微生物学、特に蛍光顕微鏡検査とフローサイトメトリー分析のために広く使用されている蛍光核酸染色です。蛍光測定ベースの分析、つまり、バルクサンプル測定からの蛍光強度の分析は、顕微鏡またはフローサイトメトリーよりも費用対効果が高く、迅速でアクセス可能ですが、アプリケーション固有のキャリブレーションが必要です。ここでは、食品安全分析のためのSYTO 9の関連性を示します。食品の安全性に関連する4種類の細菌種(Bacillus cereus、Escherichia coli、Salmonella enterica subhimurium、Staphylococcus aureus)を染色しました。時間の、蛍光強度に対するこれらの治療パラメーターの影響を調査するため。EDTAの添加と染色期間の増加は蛍光強度に大きな影響を与えず、調査した細菌細胞濃度範囲(〜105-108 CFU/mL)で0.5または1μMのSYTO 9を使用することに有意差はありませんでした。蛍光強度に対する細菌細胞濃度は種固有でした。異なる細菌細胞濃度では、蛍光強度に対する種の影響は異なります。この相互作用は、食品安全環境から採取したサンプルから予想されるように、混合細菌懸濁液中の細菌細胞濃度の決定のための一般的な蛍光測定ベースのプロトコルの開発を複雑にします。
SYTO 9は、微生物学、特に蛍光顕微鏡検査とフローサイトメトリー分析のために広く使用されている蛍光核酸染色です。蛍光測定ベースの分析、つまり、バルクサンプル測定からの蛍光強度の分析は、顕微鏡またはフローサイトメトリーよりも費用対効果が高く、迅速でアクセス可能ですが、アプリケーション固有のキャリブレーションが必要です。ここでは、食品安全分析のためのSYTO 9の関連性を示します。食品の安全性に関連する4種類の細菌種(Bacillus cereus、Escherichia coli、Salmonella enterica subhimurium、Staphylococcus aureus)を染色しました。時間の、蛍光強度に対するこれらの治療パラメーターの影響を調査するため。EDTAの添加と染色期間の増加は蛍光強度に大きな影響を与えず、調査した細菌細胞濃度範囲(〜105-108 CFU/mL)で0.5または1μMのSYTO 9を使用することに有意差はありませんでした。蛍光強度に対する細菌細胞濃度は種固有でした。異なる細菌細胞濃度では、蛍光強度に対する種の影響は異なります。この相互作用は、食品安全環境から採取したサンプルから予想されるように、混合細菌懸濁液中の細菌細胞濃度の決定のための一般的な蛍光測定ベースのプロトコルの開発を複雑にします。
SYTO 9 is a fluorescent nucleic acid stain that is widely used in microbiology, particularly for fluorescence microscopy and flow cytometry analyzes. Fluorimetry-based analysis, i.e., analysis of fluorescence intensity from a bulk sample measurement, is more cost effective, rapid and accessible than microscopy or flow cytometry but requires application-specific calibration. Here we show the relevance of SYTO 9 for food safety analysis. We stained four bacterial species of relevance to food safety (Bacillus cereus, Escherichia coli, Salmonella enterica subspecies enterica ser. Typhimurium, Staphylococcus aureus) with different concentrations of SYTO 9, with and without the presence of ethylenediaminetetraacetic acid (EDTA), for varying amounts of time, to investigate the effect of these treatment parameters on fluorescence intensity. The addition of EDTA and an increased staining duration did not significantly affect fluorescence intensity, and over the bacterial cell concentration range investigated (∼105-108 CFU/ml) there was no significant difference in using 0.5 or 1 μM SYTO 9. The effect of bacterial cell concentration on fluorescence intensity was species specific. At different bacterial cell concentrations, the effect of species on fluorescence intensity is different. This interaction complicates the development of a general fluorimetry-based protocol for the determination of bacterial cell concentration in a mixed bacterial suspension, as would be expected from samples taken from food safety settings.
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