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Poultry science2020Nov01Vol.99issue(11)

ポロキサマー188は、雄鶏の精子に凍結保護効果を発揮し、凍結エクステンダーのグリセロール濃度を減らすことを可能にします

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文献タイプ:
  • Journal Article
概要
Abstract

グリセロールは、凍結過程で精子への機械的損傷を減らすため、雄鶏精子のために最も広く使用されている凍結脱栓症です。細胞毒性がある可能性のある高分子量と粘度にもかかわらず、グリセロールは凍結保存プロセス中に細胞に損傷を引き起こし、生殖能力が低下する可能性があります。Poloxamer 188(P188)は、多くの種で有効な胚凍結保存サプリメントであり、細胞株および植物細胞にも有効です。雄鶏の精子の凍結保存におけるP188の適合性をテストしました。融解後の運動性、異常、膜機能(低浸透圧膨張試験)、ミトコンドリアの活動、生存率、アポトーシス状態、反応性酸素種の産生、ATPの含有量、および執着後のATP含有量を検討しました。AI後の出生率とhatch化可能性。2%グリセロール(G2)および8%グリセロール(G8)およびP188濃度の0%(P0)、0.1%(P0.1)、0.5%(P0.5)、およびP188濃度のグリセロール濃度を含む要因実験を実施しました。固定効果としての1%(P1)、ランダム効果として複製(7)。グリセロールとp188の間の相互作用が見つかり、G2P1はより高い品質と肥沃度をもたらしました。G8P0.5は、ほとんどのパラメーターでより良くなりましたが、G2P1に到達しませんでした。G2P1は、総および進行性の運動性、運動パラメーター(平均経路速度、直線速度、直線性、直線性)、膜機能、生存率、ミトコンドリア活性、ATP含有量、アポトーシス、死んだ精子、および反応性酸素種の生成について、有意に高い結果を示しました。。G2P1は受精卵とhatch化した卵の割合が最も高く、hatch化した卵の比率には影響はありませんでした。興味深いことに、G2はP0およびP0.1と組み合わせるとG8よりも多くのパラメーターでは効率が低く、P0.5のG8と同等であり、G2P1としてのG8処理よりも優れていました。結論として、P188は雄鶏精液の凍結保存を改善し、エクステンダーのグリセロールの減少を可能にすることができ、家禽産業に影響を与えました。

グリセロールは、凍結過程で精子への機械的損傷を減らすため、雄鶏精子のために最も広く使用されている凍結脱栓症です。細胞毒性がある可能性のある高分子量と粘度にもかかわらず、グリセロールは凍結保存プロセス中に細胞に損傷を引き起こし、生殖能力が低下する可能性があります。Poloxamer 188(P188)は、多くの種で有効な胚凍結保存サプリメントであり、細胞株および植物細胞にも有効です。雄鶏の精子の凍結保存におけるP188の適合性をテストしました。融解後の運動性、異常、膜機能(低浸透圧膨張試験)、ミトコンドリアの活動、生存率、アポトーシス状態、反応性酸素種の産生、ATPの含有量、および執着後のATP含有量を検討しました。AI後の出生率とhatch化可能性。2%グリセロール(G2)および8%グリセロール(G8)およびP188濃度の0%(P0)、0.1%(P0.1)、0.5%(P0.5)、およびP188濃度のグリセロール濃度を含む要因実験を実施しました。固定効果としての1%(P1)、ランダム効果として複製(7)。グリセロールとp188の間の相互作用が見つかり、G2P1はより高い品質と肥沃度をもたらしました。G8P0.5は、ほとんどのパラメーターでより良くなりましたが、G2P1に到達しませんでした。G2P1は、総および進行性の運動性、運動パラメーター(平均経路速度、直線速度、直線性、直線性)、膜機能、生存率、ミトコンドリア活性、ATP含有量、アポトーシス、死んだ精子、および反応性酸素種の生成について、有意に高い結果を示しました。。G2P1は受精卵とhatch化した卵の割合が最も高く、hatch化した卵の比率には影響はありませんでした。興味深いことに、G2はP0およびP0.1と組み合わせるとG8よりも多くのパラメーターでは効率が低く、P0.5のG8と同等であり、G2P1としてのG8処理よりも優れていました。結論として、P188は雄鶏精液の凍結保存を改善し、エクステンダーのグリセロールの減少を可能にすることができ、家禽産業に影響を与えました。

Glycerol is the most widely used cryoprotectant for rooster sperm because it declines the mechanical damage to sperm during the freezing process. Despite its high molecular weight and viscosity, which may be cytotoxic, glycerol can cause damage to cells during the cryopreservation process, resulting in less fertility. Poloxamer 188 (P188) is an embryo cryopreservation supplement effective in many species and also for cell lines and plant cells. We tested the suitability of P188 in the cryopreservation of rooster sperm, considering post-thawing motility, abnormalities, membrane functionality (hypo-osmotic swelling test), mitochondrial activity, viability, apoptosis status, reactive oxygen species production, and ATP content after thawing and the fertility and hatchability after AI. We carried out a factorial experiment with glycerol concentrations of 2% glycerol (G2) and 8% glycerol (G8) and P188 concentrations of 0% (P0), 0.1% (P0.1), 0.5% (P0.5), and 1% (P1) as fixed effects, with replicate (seven) as a random effect. Interactions between glycerol and P188 were found, with G2P1 yielding higher quality and fertility. G8P0.5 yielded better in most parameters, however, not reaching G2P1. G2P1 showed significantly higher results for total and progressive motility, kinetic parameters (average path velocity, straight-line velocity, and linearity), membrane functionality, viability, mitochondrial activity, and ATP content and lower apoptosis, dead sperm, and reactive oxygen species production. G2P1 resulted in the highest percentages of fertilized and hatched eggs, with no effects in the hatched eggs ratio. Interestingly, G2 was less efficient in many parameters than G8 when combined with P0 and P0.1, being equivalent to G8 with P0.5 and superior to any G8 treatment as G2P1. In conclusion, P188 could improve rooster semen cryopreservation and allow reduction of glycerol in extenders, with a consequent impact in the poultry industry.

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