実験マウスリーシュマニア症に対する候補ワクチンとしてCPG-ODNと混合したイランのトカゲリーシュマニアを使用したリーシュマニア化の評価

背景と目的：ライブ非病原性リーシュマニアタントラエは、最近、実験的リーシュマニア症（ILL）に対する効果的なワクチン候補として有望なアプローチを提供しました。ここでは、L. BALB/Cマウスの主要感染症に対するCPGアジュバントと混合したイランのトカゲリーシュマニアの免疫保護の可能性を評価しました。方法：雌のBALB/Cマウスの4つのグループが研究に含まれていました。1番目と2番目のグループは、それぞれPBSとCPGを受けました。免疫されたグループは、2×105の病気のプロマスティゴテとCPGミックス化された病気（ILL+CPG）を受けました。右のフットパッドで注射は皮下で行われました。3週間後、すべてのマウスには、Leishmania MajoregFPの2×105メタサイクリックプロマスティゴートで挑戦されました。接種は左のfootpadで行われました。フットパッドの腫れとin vivo蛍光イメージングの測定を使用して、感染経過中の疾患の進行を評価しました。チャレンジの8週間後、すべてのマウスを犠牲にし、サイトカインレベル（IFN-γ、IL-4、およびIL-10）および血清抗体濃度（IgG2AおよびIgG1）をELISAアッセイ、グリスアッセイを使用した窒素酸化物産生、およびアルギナーゼ活性を使用して使用します。培養脾細胞では、測定されました。さらに、直接蛍光顕微鏡分析とQPCRアッセイを使用して、脾寄生虫の負担を定量化しました。結果：結果は、病気+CPGで免疫したマウスが皮膚病変の発生に対して保護されていることを示しました。さらに、彼らは対照群と比較して、寄生虫負荷の大幅な減少を示しました。観察された保護は、IFN-γのより高い産生、およびIL-4レベルの低下に関連していました。さらに、結果は、他のグループと比較して、ILL+CPG群でアルギナーゼ活性が低下したことを実証しました。結論：ILL+CPGを使用した予防接種は、保護免疫を誘発します。適切なアジュバントを持つ病気が、リーシュマニア症に対する予防接種に適した選択であることを示しています。

Background and Objectives: The live non-pathogenic Leishmania tarantolae has recently provided a promising approach as an effective vaccine candidate against experimental leishmaniasis (ILL). Here, we evaluated the immunoprotective potential of the live Iranian Lizard Leishmania mixed with CpG adjuvant against L. major infection in BALB/c mice. Methods: Four groups of female BALB/c mice were included in the study. The first and second groups received PBS and CpG, respectively. The immunized groups received 2 × 105 ILL promastigotes and the CpG-mixed ILL (ILL+CpG). Injections were performed subcutaneously in the right footpad. Three weeks later, all mice were challenged with 2 × 105 metacyclic promastigotes of Leishmania majorEGFP ; inoculation was done in the left footpad. The measurement of footpad swelling and in vivo fluorescent imaging were used to evaluate disease progress during infection course. Eight weeks after challenge, all mice were sacrificed and the cytokines levels (IFN-γ, IL-4, and IL-10) and sera antibodies concentrations (IgG2a and IgG1) using ELISA assay, nitric oxide production using Griess assay, and arginase activity in cultured splenocytes, were measured. In addition, direct fluorescent microscopy analysis and qPCR assay were used to quantify the splenic parasite burden. Result: The results showed that mice immunized with ILL+CpG were protected against the development of the dermal lesion. Moreover, they showed a significant reduction in the parasite load, in comparison to the control groups. The observed protection was associated with higher production of IFN-γ, as well as a reduction in IL-4 level. Additionally, the results demonstrated that arginase activity was decreased in ILL+CpG group compared to other groups. Conclusion: Immunization using ILL+CpG induces a protective immunity; indicating that ILL with an appropriate adjuvant would be a suitable choice for vaccination against leishmaniasis.