標的がん治療薬のためのカテプシン-B切断可能なリンカーの迅速で高収量の固相合成

抗体薬物コンジュゲート（ADC）は、従来の化学療法に関連する全身毒性を避けながら、強力なペイロードを腫瘍に選択的に提供する抗がん剤の新たなクラスを構成します。ADC開発にとって重要なのは、ターゲットセルの内部を分解し、それにより有毒なペイロードを放出するように設計された血清安定リンカーです。バリン - シトルリン（VAL-CIT）モチーフを含むプロテアーゼが切断可能なリンカーは、3つのFDA承認ADCに正常に組み込まれており、多数の前臨床候補に見られます。ここでは、以前の合成に関連する広範な保護グループ操作と骨の折れるクロマトグラフィーを回避し、標準的な方法よりも最大10倍高い収量を提供する、バルシットリンカーの高収量で容易な合成戦略を提示します。この方法は簡単にスケーラブルであり、費用対効果の高い結合試薬と高負荷2-クロロトリチル塩化物（2-CTC）樹脂を利用します。モジュール性により、合成の最終段階でさまざまな共役ハンドルを導入できます。このような類似物への容易なアクセスは、ADC生成のために利用可能な酵素的に切断可能なリンカーのレパートリーを拡大するのに役立ちます。この方法論は、選択性調整ツールとして不自然なアミノ酸を含むリンカー類似体への堅牢で簡単なライブラリ生成と将来の探査を強化します。

Antibody-drug conjugates (ADCs) constitute an emerging class of anticancer agents that deliver potent payloads selectively to tumors while avoiding systemic toxicity associated with conventional chemotherapeutics. Critical to ADC development is a serum-stable linker designed to decompose inside targeted cells thereby releasing the toxic payload. A protease-cleavable linker comprising a valine-citrulline (Val-Cit) motif has been successfully incorporated into three FDA-approved ADCs and is found in numerous preclinical candidates. Herein, we present a high-yielding and facile synthetic strategy for a Val-Cit linker that avoids extensive protecting group manipulation and laborious chromatography associated with previous syntheses and provides yields that are up to 10-fold higher than by standard methods. This method is easily scalable and takes advantage of cost-effective coupling reagents and high loading 2-chlorotrityl chloride (2-CTC) resin. Modularity allows for introduction of various conjugation handles in final stages of the synthesis. Facile access to such analogues serves to expand the repertoire of available enzymatically cleavable linkers for ADC generation. This methodology empowers a robust and facile library generation and future exploration into linker analogues containing unnatural amino acids as a selectivity tuning tool.