固定時点でのIC50による共有結合阻害剤のin vitro効力を記述することの利点は、共有結合阻害剤のIC50測定を提供します。

近年、この分野での文献報告の爆発をもたらした共有結合阻害剤の特定を目的とした創薬の取り組みの復活が見られました。これらのレポートとブレークスルーは、阻害剤を最適化するために、SARキャンペーンで業界全体で行われた多大な投資を強調しています。共有結合阻害剤の効力は、一般に、単純なIC50ではなく、時間に依存しない運動パラメーターKinACT/KIによってより正確に記述されると考えられています。後者は時間依存パラメーターであるためです。酵素基質濃度は、生理学的に関連する細胞ベースのシステムにおける酵素学実験から派生したパラメーターを表現型行動に翻訳しようとする際に考慮すべき追加の重要な要因です。IC50、時間、基質濃度、KinACT/KIの関係に関する理論的および実験的調査により、SARの最適化に有意義なデータを提供するための効果的なアプローチが提供されました。生理学的基質濃度と組み合わせた長いインキュベーション（> 1H）で提供されるIC50値を使用して、JAK3の不可逆的な共有結合阻害剤プログラムに対して生成したデータは、薬化学者に最適な情報を迅速かつ効率的な方法で提供しました。さらに、共有結合阻害剤プログラムを実行した他の酵素システムに適用することにより、この方法の幅広い適用性を文書化します。

Recent years have seen a resurgence in drug discovery efforts aimed at the identification of covalent inhibitors which has led to an explosion of literature reports in this area and most importantly new approved therapies. These reports and breakthroughs highlight the significant investments made across the industry in SAR campaigns to optimize inhibitors. The potency of covalent inhibitors is generally considered to be more accurately described by the time-independent kinetic parameter kinact/Ki rather than a by a simple IC50 since the latter is a time-dependent parameter. Enzyme substrate concentrations are an additional important factor to consider when attempting to translate parameters derived from enzymology experiments to phenotypic behavior in a physiologically relevant cell-based system. Theoretical and experimental investigations into the relationship between IC50, time, substrate concentration and Kinact/Ki provided us with an effective approach to provide meaningful data for SAR optimization. The data we generated for our JAK3 irreversible covalent inhibitor program using IC50 values provided by enzyme assays with long incubations (>1h) coupled with physiological substrate concentration provided the medicinal chemist with optimal information in a rapid and efficient manner. We further document the wide applicability of this method by applying it to other enzymes systems where we have run covalent inhibitor programs.