チアミン状態の評価のための赤血球トランスケトラーゼ活性係数（ETKAC）アッセイプロトコル

ビタミンB1（チアミン）は、特にエネルギー代謝において、多くの代謝プロセスの補因子として作用する必須栄養素です。臨床症状は非特異的であり、無症状の欠乏の認識は困難ですが、古典的なチアミン欠乏症の症状は岩毛として認識されています。したがって、チアミン状態の信頼できるバイオマーカーが必要です。チアミン二リン酸は、赤血球トランスケトラーゼ（ETK）を含むトランスケトラーゼの補因子です。チアミン状態の間接的で機能的なマーカーとしてのETK活性アッセイは、50年以上にわたって使用されてきました。ETK活性アッセイは、チアミン状態の敏感で特異的なバイオマーカーを提供します。ただし、アッセイの調和の欠如のために、不足のカットオフに対するコンセンサスの欠如があります。ここでは、ETK活性の測定のための段階的なプロトコルとETK活性係数の計算を提供します。これには、必要な機器と化学物質の詳細な説明や品質管理手順のガイダンスが含まれます。プロトコルの調和は、チアミン不足のために国際的に認識されたカットオフの開発の基礎を提供します。信頼性を提供するために、品質管理材料の確立と品質保証スキームが推奨されます。これにより、ETKアクティビティアッセイがチアミン状態を評価するための重要な方法であり続けることが保証されます。

Vitamin B1 (thiamine) is an essential nutrient that acts as a cofactor for a number of metabolic processes, particularly in energy metabolism. Symptoms of classic thiamine deficiency are recognized as beriberi, although clinical symptoms are nonspecific and recognition of subclinical deficiency is difficult. Therefore, reliable biomarkers of thiamine status are required. Thiamine diphosphate is a cofactor for transketolase, including erythrocyte transketolase (ETK). The ETK activity assay as an indirect, functional marker of thiamine status has been used for over 50 years. The ETK activity assay provides a sensitive and specific biomarker of thiamine status; however, there is a lack of consensus over the cutoffs for deficiency, partly due to a lack of assay harmonization. Here, we provide a step-by-step protocol for the measurement of ETK activity and the calculation of the ETK activity coefficient, including detailed explanations of equipment and chemicals required and guidance for quality control procedures. Harmonization of the protocol will provide the basis for the development of internationally recognized cutoffs for thiamine insufficiency. The establishment of quality control materials and a quality assurance scheme are recommended to provide reliability. This will ensure that the ETK activity assay remains an important method for the assessment of thiamine status.