競合結合反応を通じてビオチン化種を特徴付けるための二重標識生体分子

ストレプトアビジンに結合するビオチン化分子の能力は、分子あたりの総結合ビオチンの滴定よりも、標的ビオチン化の成功のより機能的な尺度である可能性があります。結合能力は、関心のあるビオチン化抗体（またはタンパク質、リガンド、受容体など）が参照抗体（またはタンパク質）とビオチンと二重標識されたタンパク質と競合する競合アッセイによって評価できることが実証されました。磁気ビーズの表面にコーティングされたストレプトアビジンの結合部位の電気化学的微量（ECL）部分。ECLシグナルに逆に関連して、ビオチン化抗体の結合能力は、単一の測定ではなく、簡単に獲得したデータ系列の複数のセットによって再現性に再現できます。この方法は、タンパク質、リガンド、受容体、ポリペプチドなどのビオチン化種の日常的な特性評価のために、自動化されたECLアナライザーまたはその他の読み出し機器を備えた通常の研究室で使用できます。

The capability of biotinylated molecules to bind streptavidin may be a more functional measure of the success of target biotinylation than titration of total bound biotins per molecule. It was demonstrated that the binding capability could be assessed by a competitive assay, in which a biotinylated antibody (BA) (or protein, ligand, receptor etc.) of interest competed with a reference antibody (or a protein) dually labeled with biotin and electrochemiluminescence (ECL) moieties for the binding sites of streptavidin coated on the surface of magnetic beads. Inversely related to the ECL signal, the binding capability of a biotinylated antibody can be reproducibly evaluated by multiple sets of easily acquired data series rather than by a single measurement. This method can be employed in an ordinary laboratory with an automated ECL analyzer or other readout instruments for routine characterization of any biotinylated species, such as proteins, ligands, receptors, and polypeptides.