細胞膜で発現されたアゴニスト抗ラジオ保護105の新しい遺伝子送達ベクターは、インフルエンザに対するDNA予防接種の補助効果を示しています

放射線保護105（RP105）（CD180とも呼ばれる）は、細胞内シグナル伝達ドメインを欠く孤児で型破りなToll様受容体（TLR）です。アゴニックな抗RP105モノクローナル抗体（mAb）は、B細胞にRP105を架橋することができ、B細胞の増殖と活性化をもたらします。抗RP105 MABは強力なアジュバント効果もあり、ミョウバンと比較してより高いレベルの抗原特異的抗体を提供します。ただし、抗RP105 MABと抗原の間の共有結合には、アジュバント性が必要です。これは、抗RP105 MABと一部の抗原、特にマルチトランスマンブレンタンパク質との間のリンクにより、予防接種の障害の可能性です。私たちは以前、抗体遺伝子ベースの送達を使用してマウスに迅速かつ強力な組換えmAbを誘導することに成功しました。抗RP105 MABと抗原の間の共有結合を簡素化するために、IgG-B細胞受容体（TM）（αRP105-TM）の膜貫通ドメインに結合した組換え抗RP105 MAB（αRP105）の遺伝的構造を生成しました。抗RP105 mAbは、細胞膜を介して抗原をリンクします。同じ細胞上のインフルエンザウイルスの膜タンパク質であるαRP105-TMと抗原ヘマグルチニンの発現を確認しました。また、αRP105-TMは、in vitroで細胞表面RP105に応じて、成熟細胞と未熟な細胞の両方を含む脾臓B細胞を活性化できることも発見しました。αRP105-TMのアジュバント性を評価するために、αRP105-TMおよびヘマグルチニンをコードするプラスミドとマウスにDNA免疫を実施し、その後、インフルエンザウイルスの致死量の感染症に挑戦しました。次に、部分的には、しかし有意にヘマグルチニン特異的抗体を得て、インフルエンザウイルス感染の致死量に対する保護効果を観察しました。現在のαRP105-TMは、αRP105-TMをコードする発現プラスミドと標的抗原をコードする単純なプラスミドの単純な調製を介して、ワクチンのアジュバント性を提供する可能性があります。

Radioprotective 105 (RP105) (also termed CD180) is an orphan and unconventional Toll-like receptor (TLR) that lacks an intracellular signaling domain. The agonistic anti-RP105 monoclonal antibody (mAb) can cross-link RP105 on B cells, resulting in the proliferation and activation of B cells. Anti-RP105 mAb also has a potent adjuvant effect, providing higher levels of antigen-specific antibodies compared to alum. However, adjuvanticity is required for the covalent link between anti-RP105 mAb and the antigen. This is a possible obstacle to immunization due to the link between anti-RP105 mAb and some antigens, especially multi-transmembrane proteins. We have previously succeeded in inducing rapid and potent recombinant mAbs in mice using antibody gene-based delivery. To simplify the covalent link between anti-RP105 mAb and antigens, we generated genetic constructs of recombinant anti-RP105 mAb (αRP105) bound to the transmembrane domain of the IgG-B cell receptor (TM) (αRP105-TM), which could enable the anti-RP105 mAb to link the antigen via the cell membrane. We confirmed the expression of αRP105-TM and the antigen hemagglutinin, which is a membrane protein of the influenza virus, on the same cell. We also found that αRP105-TM could activate splenic B cells, including both mature and immature cells, depending on the cell surface RP105 in vitro. To evaluate the adjuvanticity of αRP105-TM, we conducted DNA immunization in mice with the plasmids encoding αRP105-TM and hemagglutinin, followed by challenge with an infection of a lethal dose of an influenza virus. We then obtained partially but significantly hemagglutinin-specific antibodies and observed protective effects against a lethal dose of influenza virus infection. The current αRP105-TM might provide adjuvanticity for a vaccine via a simple preparation of the expression plasmids encoding αRP105-TM and of that encoding the target antigen.