Hotairは、DNMT1を調節し、胃腺癌におけるmiR-148bでスポンジすることにより、腫瘍抑制遺伝子であるPCDH10のメチル化を誘導します。

目的：HOX転写産物のアンチセンス間RNA（Hotair）は、長い非コーディングRNAとして、さまざまな癌のエピジェネティックなメカニズムによって発がんを調節することが報告されています。プロトカドヘリン10（PCDH10）はよく知られている腫瘍抑制遺伝子の1つであり、胃癌（GC）で頻繁にメチル化されています。私たちは、胃が発がんにおける標的遺伝子にHotairがどのように寄与するかの詳細な経路を調査することを目指しました。 材料と方法：GCの発がんと転移に関する熱気のメカニズムを調査しました。メチル化特異的PCRを実施して、HotairとPCDH10の相互作用を特定しました。さらに、デュアル - ルシフェラーゼレポーターアッセイとRNA免疫沈降（RIP）アッセイによるmiR-148bとhotairとの相互作用を調査しました。 結果：Hotairの発現は、GC組織（P <0.05）およびGC細胞株（P <0.01）で有意に上方制御され、PCDH10はGC組織でダウンレギュレートされました（P <0.05）。Hotair（Si-Hotair1および2）のノックダウンは、PCDH10のmRNA/タンパク質発現を有意に上方制御し、MKN 28およびMKN 74のコントロールと比較してPCDH10のメチル化を減少させました。発現、およびHotairの過剰発現により、DNMT1発現が増加しました。RIPでは、miR-148bがHotairと相互作用することがわかりました。Si-HotairsはmiR-148B発現を増加させ、miR-148bは逆に熱い発現を逆に減少させました。Si-HotairsとmiR-148Bは、DNMT1発現を減少させ、コントロールと比較してPCDH10発現を増加させました。 結論：この研究は、HotairがmiR-148BおよびDNMT1と相互作用し、最終的にPCDH10メチル化につながり、GCの進行に寄与することを実証しました。私たちの調査結果は、GCのエピジェネティックなメカニズムにおけるHotairの詳細な経路をよりよく理解しています。

PURPOSE: HOX transcript antisense intergenic RNA (HOTAIR), as a long non-coding RNA, has been reported to regulate carcinogenesis by epigenetic mechanism in various cancers. Protocadherin 10 (PCDH10) is one of the well-known tumor suppressor genes, and is frequently methylated in gastric cancers (GC). We aimed to investigate the detailed pathway of how HOTAIR contributes to the target gene in gastric carcinogenesis. MATERIALS AND METHODS: We investigated the mechanism of HOTAIR on carcinogenesis and metastasis of GC. Methylation-specific PCR was performed to identify the interaction between HOTAIR and PCDH10. In addition, we investigated the interaction between miR-148b and HOTAIR by dual-luciferase reporter assay and RNA immunoprecipitation (RIP) assay. RESULTS: The expression of HOTAIR was significantly upregulated in GC tissues (p<0.05) and GC cell lines (p<0.01), while PCDH10 was downregulated in GC tissues (p<0.05). The knockdown of HOTAIR (si-HOTAIR1 and 2) significantly upregulated the mRNA/protein expression of PCDH10 and reduced the methylation of PCDH10 compared to the control in MKN 28 and MKN 74. Si-HOTAIR1 and 2 significantly reduced DNA methyltransferase 1 (DNMT1) expression, and overexpression of HOTAIR increased DNMT1 expression. In RIP, we found that miR-148b interacted with HOTAIR. Si-HOTAIRs increased miR-148b expression, and miR-148b mimic inversely reduced HOTAIR expression. Si-HOTAIRs and miR-148b mimic reduced DNMT1 expression and increased PCDH10 expression compared to the control. CONCLUSION: This study demonstrated that HOTAIR interacts with miR-148b and DNMT1, eventually leading to PCDH10 methylation, which contributes to the progression of GC. Our findings provide a better understanding for detailed pathway of HOTAIR in epigenetic mechanism of GC.