ヒト白血球抗原に特異的な抗体を分析するためのヒト化マウスモデルの開発（HLA）

臓器移植において、ヒト白血球抗原（HLA）誤った移植片は、B細胞によって産生されるドナー特異的抗HLA抗体（DSA）による細胞媒介免疫応答の活性化だけでなく、慢性抗体媒介拒絶反応の発生も誘導するだけでなく、移植片内皮と相互作用する血漿細胞。DSAによる抗体を介した拒絶反応を克服できる場合、移植後の長期生存率の有意な改善が予想されます。ただし、DSAを生産または制御するメカニズムはまだ解明されていない。ここ数十年で、「ヒト化された」マウスモデルは、ヒト免疫システムの基礎研究に広く使用されてきましたが、DSA産生のメカニズムを分析するためのヒト化されたマウスモデルはまだ確立されていません。したがって、ヒト末梢血単核細胞（PBMC）で投与された重度の免疫不全マウス（NSGマウス）を使用してヒト化マウスを作成することを目指しました。当初、これらのマウスでは、非常に低いレベルのヒト総IGGと抗HLA抗体（ABS）が検出されました。次の試みでは、ヒトCD40リガンド（H-CD40L）単独またはH-CD40LおよびヒトB細胞活性化因子を安定してトランスフェクトしたフィーダー細胞を培養することにより、調節性T細胞とのさまざまなHLA抗原組み合わせのPBMCを混合し、それらを前処理しました。（H-BAFF）。その後、それらは対応する照射刺激因子PBMCと共培養され、すべての細胞をナイーブNSGマウスに投与しました。3つのヒト化されたモデルはすべて、十分なヒトTotal-IGGおよび抗HLA抗体産生を有していましたが、非特異的抗HLA ABSは十分に検出されたのに対し、同種特異的抗HLA AB産生が顕著に抑制されました。したがって、この新しいヒト化されたマウスモデルは、抗同意性ヒトB細胞耐性誘導のメカニズムを分析するのに役立つ可能性があります。

In organ transplantation, human leukocyte antigen (HLA)-mismatch grafts not only induce the activation of cellular mediated immune response but also the development of chronic antibody-mediated rejection due to the donor-specific anti-HLA antibody (DSA) produced by B cells and plasma cells interacting with the graft endothelium. Significant improvement in long-term survival after transplantation can be expected if antibody-mediated rejection due to the DSA can be overcome. However, the mechanism of producing or controlling the DSA remains to be elucidated. In recent decades, "humanized" mouse models have been widely used for the basic research of human immune systems, but a humanized mouse model to analyze the mechanism of DSA production has not been established yet. Thus, we aimed to create a humanized mouse using a severe immunodeficiency mouse (NSG mouse) administered with human peripheral blood mononuclear cells (PBMCs). Initially, we detected a very low level of human total-IgG and no anti-HLA antibodies (Abs) in these mice. In our next attempt, we mixed PBMCs of various HLA antigenic combinations with or without regulatory T cells and preconditioned them by culturing on feeder cells stably transfected with human CD40 ligand (h-CD40L) alone or with h-CD40L and human B cell activating factor (h-BAFF). They were subsequently co-cultured with the corresponding irradiated stimulator PBMCs, and all cells were administered into naïve NSG mice. Although all three humanized models had sufficient human total-IgG and anti-HLA antibody production, allospecific anti-HLA Ab production was prominently suppressed whereas non-specific anti-HLA Abs were sufficiently detected. Therefore, this novel humanized mouse model might be useful for analyzing the mechanism of anti-allogeneic human B cell tolerance induction.