in vitroでの骨代謝のグルココルチコイド誘発性障害に対するイグラチモドの影響

はじめに：グルココルチコイドは、関節リウマチ（RA）を含むさまざまな疾患の治療に広く使用されています。しかし、最も頻繁かつ重度の悪影響の1つは、グルココルチコイド誘発骨粗鬆症（GIOP）です。Iguratimod（IGU）は、日本で開発された新しい従来の合成疾患修飾抗リウマチ薬です。この研究の目的は、in vitroでの骨代謝のグルココルチコイド誘発性障害に対するIGUの影響を調査することです。 材料と方法：マウス骨髄由来細胞の破骨細胞形成、タレトレート耐性酸ホスファターゼ染色、吸収ピットアッセイ、ウエスタンブロッティング、リアルタイムポリメラーゼ連鎖反応（PCR）、およびmRNAシーケンスを実施しました。MC3T3-E1細胞の骨芽細胞形成において、アルカリホスファターゼ（ALP）染色と活性、アリザリン赤染色、およびmRNAシーケンスを実施し、リアルタイムPCRとウエスタンブロッティングを実施しました。-Y4セル。 結果：IGUは、核因子Kappa-B（RANK）/腫瘍壊死因子受容体（TNFR）に関連する因子6（TRAF6）の受容体活性化因子の阻害により、破骨細胞、分化、および骨吸収活性のデキサメタゾン誘発性の増加を有意に抑制しました。/核因子Kappa-B（NFκB）-P52経路。MC3T3-E1細胞では、IGUは、ALP活性、骨鉱化、および骨芽細胞関連遺伝子およびタンパク質発現のデキサメタゾン誘発ダウンレギュレーションを有意にアップレギュレートしました。MLO-Y4細胞では、IGUは、ALPおよびオステオカルシンの遺伝子発現のデキサメタゾン誘発性ダウンレギュレーションを有意にアップレギュレートし、またデキサメタゾンなしのNFκBリガンド（RANKL）/オステオプロテジェリン遺伝子発現比のダウンレギュレート化された受容体活性化 結論：これらの結果は、IGUが骨代謝のグルココルチコイド誘発性障害を改善し、RAに関連するGIOPに対してプラスの効果を示す可能性があることを示唆しています。

INTRODUCTION: Glucocorticoids are widely used to treat various diseases including rheumatoid arthritis (RA); however, one of the most frequent and severe adverse effects is glucocorticoid-induced osteoporosis (GIOP). Iguratimod (IGU) is a novel conventional synthetic disease-modifying anti-rheumatic drug developed in Japan. The aim of this study is to investigate the effects of IGU on glucocorticoid-induced disorder of bone metabolism in vitro. MATERIALS AND METHODS: In osteoclastogenesis of mouse bone marrow-derived cells, tartrate-resistant acid phosphatase staining, resorption pit assay, western blotting, real-time polymerase chain reaction (PCR), and mRNA sequencing were performed. In osteoblastogenesis of MC3T3-E1 cells, alkaline phosphatase (ALP) staining and activity, alizarin red staining, and mRNA sequencing were performed, and real-time PCR and western blotting were conducted in MC3T3-E1 cells and murine osteocyte-like cell line MLO-Y4 cells. RESULTS: IGU significantly suppressed a dexamethasone-induced increase in osteoclasts, differentiation, and bone resorption activity by inhibition of the receptor activator of the nuclear factor kappa-B (RANK)/tumor necrosis factor receptor (TNFR)-associated factor 6 (TRAF6)/nuclear factor kappa-B (NFκB)-p52 pathway. In MC3T3-E1 cells, IGU significantly upregulated dexamethasone-induced downregulation of ALP activity, bone mineralization, and osteoblast-related gene and protein expression. In MLO-Y4 cells, IGU significantly upregulated dexamethasone-induced downregulation of the gene expression of ALP and osteocalcin, and also downregulated receptor activator of NFκB ligand (RANKL)/osteoprotegerin gene expression ratio without dexamethasone. CONCLUSION: These results suggest that IGU may improve glucocorticoid-induced disorder of bone metabolism and may exhibit positive effects against GIOP associated with RA.