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本研究では、N、N-ジメチルトリプタミン（DMT）の測定のための抽出溶媒（VA-EO-DLLME）としての天然のエッセンシャルオイルに基づいた、新規溶媒を含まない渦assist式分散液液微動微小抽出代替の開発について説明します。ヒト血漿中のハルミン（HRM）、ハルマリン（HRL）およびテトラヒドロアミン（THH）（アヤワスカ茶、サイケデリックな植物の調製に見られる化合物）。完全な要因とボックスビーンケンの実験設計を通じて最適化した後、このVa-eo-dllmeに続いて、超高性能液体クロマトグラフィータンデム質量分析（UHPLC-MS/MS）が完全に検証され、本物の血漿標本に適用されました。サンプルの調製は、60 mgのNaCl、100μlのホウ酸緩衝液、100μlのユーカリグローブルスエッセンシャルオイルを200μLのアリコートのヒト血漿に添加することで構成されていました。30秒の渦攪拌と5分間の遠心分離（10,000 rpm）を続けた後、80μLのオイル上清を乾燥させ、UHPLC-MS/MSシステムに注射する前に移動相で再懸濁しました。最適化されると、検証済みの方法により、すべての分析物に対してLODSが1.0 ng ml-1以下になりました。LOQは、DMT、HRL、HRMで1.0 ng ML-1、THHで2.0 ng ML-1でした。この方法は、最大150 ng ML-1（R2≥0.9926）のLOQの範囲にわたって線形であることが示されています。日中/日間精度と精度は、3つの品質管理（QC）レベルで受け入れ基準を満たしました。追加の中間精密研究では、低QCおよび中QCでのTHHとHRLを除き、3つの異なるオイル源で全体的な方法のパフォーマンスが類似していることが実証されました。マトリックス効果の評価は、56％から83％の範囲の優勢なイオン抑制を示しました。回復は33から101％まで変化し、平均50±15.8％でした。選択性の研究では、干渉は示されませんでした。13の本物のサンプルの分析により、方法の実現可能性が証明されました。最後に、私たちの小説VA-EO-DLLMEアプローチは、抽出溶媒として簡単にアクセスできる完全に緑の素材の使用に基づいて、非常にシンプルで高速で、費用対効果が高く、環境に優しい代替品を提供すると考えています。これは、研究者が法医学的および臨床的文脈における微小抽出法の有機溶媒の代替品として、エッセンシャルオイルなどの新規および創造的な代替品を調査するインセンティブを表している可能性があります。
本研究では、N、N-ジメチルトリプタミン（DMT）の測定のための抽出溶媒（VA-EO-DLLME）としての天然のエッセンシャルオイルに基づいた、新規溶媒を含まない渦assist式分散液液微動微小抽出代替の開発について説明します。ヒト血漿中のハルミン（HRM）、ハルマリン（HRL）およびテトラヒドロアミン（THH）（アヤワスカ茶、サイケデリックな植物の調製に見られる化合物）。完全な要因とボックスビーンケンの実験設計を通じて最適化した後、このVa-eo-dllmeに続いて、超高性能液体クロマトグラフィータンデム質量分析（UHPLC-MS/MS）が完全に検証され、本物の血漿標本に適用されました。サンプルの調製は、60 mgのNaCl、100μlのホウ酸緩衝液、100μlのユーカリグローブルスエッセンシャルオイルを200μLのアリコートのヒト血漿に添加することで構成されていました。30秒の渦攪拌と5分間の遠心分離（10,000 rpm）を続けた後、80μLのオイル上清を乾燥させ、UHPLC-MS/MSシステムに注射する前に移動相で再懸濁しました。最適化されると、検証済みの方法により、すべての分析物に対してLODSが1.0 ng ml-1以下になりました。LOQは、DMT、HRL、HRMで1.0 ng ML-1、THHで2.0 ng ML-1でした。この方法は、最大150 ng ML-1（R2≥0.9926）のLOQの範囲にわたって線形であることが示されています。日中/日間精度と精度は、3つの品質管理（QC）レベルで受け入れ基準を満たしました。追加の中間精密研究では、低QCおよび中QCでのTHHとHRLを除き、3つの異なるオイル源で全体的な方法のパフォーマンスが類似していることが実証されました。マトリックス効果の評価は、56％から83％の範囲の優勢なイオン抑制を示しました。回復は33から101％まで変化し、平均50±15.8％でした。選択性の研究では、干渉は示されませんでした。13の本物のサンプルの分析により、方法の実現可能性が証明されました。最後に、私たちの小説VA-EO-DLLMEアプローチは、抽出溶媒として簡単にアクセスできる完全に緑の素材の使用に基づいて、非常にシンプルで高速で、費用対効果が高く、環境に優しい代替品を提供すると考えています。これは、研究者が法医学的および臨床的文脈における微小抽出法の有機溶媒の代替品として、エッセンシャルオイルなどの新規および創造的な代替品を調査するインセンティブを表している可能性があります。
The present study describes the development of a novel solvent-free vortex-assisted dispersive liquid-liquid microextraction alternative based on a natural essential oil as extracting solvent (VA-EO-DLLME) for the determination of N,N-dimethyltryptamine (DMT), harmine (HRM), harmaline (HRL) and tetrahydroarmine (THH) (compounds found in the ayahuasca tea, a psychedelic plant preparation) in human plasma. After optimization through full factorial and Box-Behnken experimental designs, this VA-EO-DLLME followed by ultra-high performance liquid chromatography-tandem mass spectrometry (UHPLC-MS/MS) was completely validated and applied to authentic plasma specimens. Sample preparation consisted in the addition of 60 mg of NaCl, 100 μL of borate buffer and 100 μL of Eucalyptus globulus essential oil to a 200 μL aliquot of human plasma. After 30 s of vortex agitation followed by 5 min of centrifugation (10,000 rpm), 80 μL of the oil supernatant was dried and resuspended in mobile phase prior to injection into the UHPLC-MS/MS system. Once optimized, the validated method yielded LoDs ≤1.0 ng mL-1 for all analytes. LoQ was 1.0 ng mL-1 for DMT, HRL and HRM and 2.0 ng mL-1 for THH. The method has shown to be linear over the range of LoQ up to 150 ng mL-1 (r2 ≥ 0.9926). Intra/inter-day precision and accuracy met the acceptance criteria at three quality control (QC) levels. An additional intermediate precision study demonstrated that, except for THH and HRL at low and medium QCs, the overall method performance was similar for the three different oil sources. Matrix effect evaluation showed predominant ion suppression, ranging from 56% to 83%. Recovery varied from 33 up to 101% with an average of 50 ± 15.8%. Selectivity studies showed no interferences. Analysis of 13 authentic samples proved method feasibility. Finally, we believe that our novel VA-EO-DLLME approach offers a very simple, fast, cost-effective and eco-friendly alternative based on the use of an easily accessible and entirely green material as an extracting solvent. This may represent an incentive for researchers to investigate novel and creative alternatives, such as essential oils, as substitutes of organic solvents for microextraction methods in forensic and clinical contexts.
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