親水性高分岐ポリマーコーティングsiRNA/ポリアミドロンを含む脂質複合体は、高コロイドの安定性と効率的なRNAiのための調製

siRNAを使用したRNA干渉（RNAI）は、癌および遺伝的障害の治療に使用するために多くの注目を集めています。RNAiベースの治療薬を確立するには、効率的なsiRNAナノキャリアの開発が望まれます。以前、私たちは遺伝子ベクターとして核酸とともに複合体を形成できるポリアミドアミンのデンドロンを含む脂質を開発しました。特に、不飽和アルキル鎖（DL-G1-U2）を含むデンドロン脂質は、膜融合による効率的なエンドソーム脱出を誘導し、in vitroで効率的なトランスフェクションにつながりました。この研究では、オレイル/リノレル基（DL-G1-U3）を持つデンドロン脂質は、膜融合活性をさらに増加させるように設計されました。実際、DL-G1-U3/siRNA複合体は、従来のDL-G1-U2/siRNA複合体よりも効率的に標的遺伝子のより高い膜融合活性とノックダウンを達成しました。親水性ポリマー、ハイパーブランチ型ポリグリシドールラウリルエステル（HPG-LAU）を、コロイドの安定性を提供するために、DL-G1-U3/siRNA複合体の表面でさらに修飾しました。HPG-LAUの表面修飾は、HPG-LAUのない複合体よりも生理学的状態でコロイドの安定性を増加させました。重要なことに、HPG-LAUでコーティングされたDL/siRNA複合体は、親のDL/siRNA複合体のそれに対して同一のRNAi効果を示し、一方、ポリ（エチレングリコール）を有する脂質（PEG-PE）を有するDL/siRNA複合体のRNAi活性は完全に妨げられました。デンドロン脂質への不飽和結合の導入とナノキャリア修飾のための適切な親水性ポリマーの選択は、in vivo siRNA送達に向けて効率的なsiRNAベクターを取得するために重要です。

RNA interference (RNAi) using siRNA has gained much attention for use in therapies for cancer and genetic disorders. To establish RNAi-based therapeutics, the development of efficient siRNA nanocarriers is desired. Earlier, we developed polyamidoamine dendron-bearing lipids able to form complexes with nucleic acids as gene vectors. Especially, dendron lipids with unsaturated alkyl chains (DL-G1-U2) induced efficient endosomal escape by membrane fusion, leading to efficient transfection in vitro. For this study, dendron lipids having oleyl/linoleyl groups (DL-G1-U3) were designed to increase membrane fusogenic activity further. Indeed, DL-G1-U3/siRNA complexes achieved higher membrane fusogenic activity and knockdown of the target gene more efficiently than conventional DL-G1-U2/siRNA complexes did. A hydrophilic polymer, hyperbranched polyglycidol lauryl ester (HPG-Lau), was modified further on the surface of DL-G1-U3/siRNA complexes to provide colloidal stability. Surface modification of HPG-Lau increased the colloidal stability in a physiological condition more than complexes without HPG-Lau. Importantly, HPG-Lau-coated DL/siRNA complexes showed identical RNAi effects to those of parental DL/siRNA complexes, whereas the RNAi activity of poly(ethylene glycol)-bearing lipid (PEG-PE)-modified DL/siRNA complexes was hindered completely. Introduction of unsaturated bonds into dendron lipids and selection of suitable hydrophilic polymers for nanocarrier modification are important for obtaining efficient siRNA vectors toward in vivo siRNA delivery.