[低酸素刺激は、鼻ポリープの粘膜上皮細胞の炎症因子の変化につながる]

目的：低酸素刺激下での鼻ポリププおよび正常な鼻粘膜の上皮細胞から分泌された炎症因子の変動と違いを比較することにより、慢性副鼻腔炎の病因における低酸素刺激の役割（CRSWNP）との低酸素刺激の役割を調査する。方法：2015年6月から2018年1月までCRSWNPと診断された68人の患者が、ジリン大学の中国と2018年1月に分析されました。これには、36人の男性と32人の女性（45.2±12.5）の女性32人が含まれます。鼻ポリープ粘膜はCRS-NPグループに含まれており、下タービネート粘膜がCRS-ITグループに含まれていました。組織病理学的結果における好酸球浸潤の程度によれば、これら2つのグループのそれぞれは、EOS-NPグループ（n = 34）、非EOS-ITグループ（n = 20）および非EOS-ITグループ（n = 20）としての好酸球浸潤および非ヨシ酸栄養浸潤にさらに分割されました。副鼻腔洞の嚢胞または鼻中隔の偏差と診断された25人の患者の下タービネート粘膜は、14人の男性と11人の女性（42.8±10.2）年を含む対照群（n = 25）に分類されました。インターロイキン17A（IL-17A）、インターフェロンγ（IFN-γ）、腫瘍壊死因子α（TNF-α）、および各グループにおける低酸素誘導因子1α（HIF-1α）の発現は、免疫組織化学染色によって分析されました。0、24、および48時間の低酸素刺激の後、各グループの原発性鼻粘膜上皮細胞におけるIL-17A、IFN-γ、TNF-αの分泌は、酵素結合免疫吸着剤アッセイ（ELISA）実験によってテストされました。HIF-1αの発現は、免疫蛍光染色とイメージングおよびウエスタンブロットによってテストされました。SPSS 17.0ソフトウェアと双方向ANOVAを統計分析に使用しました。結果：免疫組織化学染色により、IL-17AおよびTNF-αの発現が対照群ではるかに高かったことが示されました（光学密度（OD）値はそれぞれ0.37±0.03、0.53±0.02）、IFN-γおよびHIF-1αの発現はEOS-ITグループではるかに高かった（OD 0.03、0.03±0.03±0.03±0.03±0.03±0.03である。IL-17AおよびTNF-αの分泌は、対照群では、通常の状態の他のグループの分泌よりもはるかに低かった。48時間の低酸素刺激の後、IL-17AおよびTNF-αの分泌は、他のグループと比較して対照群ではるかに高かった。EOS-NPグループにおけるIFN-γの分泌は、通常の状態（（13.7±1.3）pg/ml対（11.1±1.6）pg/ml、p <0.05）のコントロールグループの分泌よりもはるかに高かった。48時間の低酸素刺激の後、コントロールグループとEOS-NPグループの間にIFN-γの差はありませんでした。HIF-1αの発現は、EOS-NPグループおよび非EOS-NPグループで減少しましたが、低酸素症への長期暴露によりCRS-ITグループおよび対照群で増加しました。HIF-1αは、主にコントロールおよびCRS-IT群の上皮細胞の細胞質に位置し、主にCRS-NPグループの上皮細胞の核に位置していました。結論：IL-17A、TNF-α、IFN-γの分泌、およびHIF-1αの発現は、低酸素刺激下での正常な鼻粘膜、ポリープ、およびcrswNPの下タービネートの間に有意差を示し、異なる細胞内局在を示します。これは、上記のタンパク質がCrswNPの病因に関与する遺伝子の転写と調節に関与していることを示しています。

Objective: To investigate the roles of hypoxic stimulation in the pathogenesis of chronic rhinosinusitis with nasal polyps (CRSwNP) by comparing the variation and differences of inflammatory factors secreted from epithelial cells of nasal polyps and normal nasal mucosa under hypoxic stimulation. Methods: Sixty-eight patients who were diagnosed with CRSwNP from June 2015 to January 2018 at China-Japan Union Hospital of Jilin University were analyzed, including 36 males and 32 females, aged (45.2±12.5) years. Nasal polyps mucosa was included in CRS-NP group and inferior turbinate mucosa was included in CRS-IT group. According to the degree of eosinophil infiltration in histopathologic results, each of these two groups was further divided into eosinophil infiltration and non-eosinophil infiltration as Eos-NP group (n=34), Non-Eos-NP group (n=34), Eos-IT group (n=20) and Non-Eos-IT group (n=20). The inferior turbinate mucosa of twenty-five patients who were diagnosed with cyst of paranasal sinus or deviation of nasal septum was classified as control group (n=25), including 14 males and 11 females, aged (42.8±10.2) years. The expression of interleukin 17A (IL-17A), interferon γ (IFN-γ), tumor necrosis factor α (TNF-α) and hypoxia-inducible factor 1α (HIF-1α) in each group was analyzed by immunohistochemical staining. After 0, 24 and 48 h hypoxic stimulation, the secretion of IL-17A, IFN-γ, TNF-α in primary nasal mucosa epithelial cells of each group was tested by enzyme-linked immune sorbent assay (ELISA) experiment; the expression of HIF-1α was tested by immunofluorescent staining and imaging and Western blot. SPSS 17.0 software and two-way ANOVA were used for statistical analysis. Results: Immunohistochemical staining showed that the expression of IL-17A and TNF-α was much higher in control group (optical density (OD) value was 0.37±0.03, 0.53±0.02, respectively) and the expression of IFN-γ and HIF-1α was much higher in Eos-IT group (OD value was 0.47±0.03, 0.39±0.02, respectively). The secretion of IL-17A and TNF-α was much lower in control group than that in other groups under normal condition. After 48 h hypoxic stimulation, the secretion of IL-17A and TNF-α was much higher in control group compared with other groups. The secretion of IFN-γ in Eos-NP group was much higher than that in control group under normal condition ((13.7±1.3) pg/ml vs (11.1±1.6) pg/ml, P<0.05). After 48 h hypoxic stimulation, there was no difference of IFN-γ between control group and Eos-NP group. The expression of HIF-1α decreased in Eos-NP group and Non-Eos-NP group while increased in CRS-IT group and control group upon prolonged exposure to hypoxia. HIF-1α was mostly located at cytoplasm of epithelial cells in control and CRS-IT group while mainly located at nucleus of epithelial cells in CRS-NP group. Conclusions: The secretion of IL-17A, TNF-α, IFN-γ and the expression of HIF-1α show significant difference between normal nasal mucosa, polyps and inferior turbinate of CRSwNP under hypoxic stimulation, presenting different subcellular localization. This illustrates the proteins above are involved in transcription and regulation of the gene responsible for the pathogenesis of CRSwNP.