細胞内KRAS特異的抗体は、エンドソーム脱出を誘導することにより、膵臓癌におけるゲムシタビンの抗腫瘍効果を高めます

KRAS変異は、膵臓癌の進行と成長に関連しており、化学耐性に寄与しており、これは膵臓癌において重大な臨床的課題をもたらします。ここで、我々は、細胞外上皮細胞癒合分子の腫瘍関連受容体（EPCAM）を介してエンドサイトーシスを介してエンドサイトーシスを介してエンドサイトーシスに内在化した後、細胞内で活性化されたGTP結合型の発癌性KRAS変異体を直接標的とするRT22-EP59抗体（AB）を開発しました。膵臓癌におけるゲムシタビンの存在下でのその相乗的抗がん効果。最初に、RT22-EP59が腫瘍関連EPCAMを特異的に認識し、エンドソームエスケープによってサイトゾルに到達したことを観察しました。さらに、RT22-EP59の抗癌効果は、高EPCAM発現膵臓癌細胞およびゲムシタビン耐性膵臓癌細胞で観察されましたが、低EPCAM発現膵臓癌細胞にほとんど影響を与えませんでした。さらに、RT22-EP59およびゲムシタビンとの共処理は、3D培養における細胞生存率、移動、および浸潤を阻害し、高EPCAM発現の細胞でRAF/ERKまたはPI3K/AKT経路を阻害することにより相乗的な抗癌活性を示しました。同所性マウスモデルでは、RT22-EP59とゲムシタビンの投与を組み合わせて腫瘍の成長を著しく阻害しました。さらに、共治療は、in vitroおよびin vivoでEMTシグナル伝達をブロックすることにより、がん転移を抑制しました。我々の結果は、RT22-EP59がKRAを標的とすることによりRASシグナル伝達を阻害することにより、ゲムシタビンの抗腫瘍活性を相乗的に増加させることを実証しました。これは、RT22-EP59およびゲムシタビンとの共治療が、KRAS変異を抱える膵臓癌患者の潜在的な治療戦略と見なされる可能性があることを示しています。

KRAS mutation is associated with the progression and growth of pancreatic cancer and contributes to chemo-resistance, which poses a significant clinical challenge in pancreatic cancer. Here, we developed a RT22-ep59 antibody (Ab) that directly targets the intracellularly activated GTP-bound form of oncogenic KRAS mutants after it is internalized into cytosol by endocytosis through tumor-associated receptor of extracellular epithelial cell adhesion molecule (EpCAM) and investigated its synergistic anticancer effects in the presence of gemcitabine in pancreatic cancer. We first observed that RT22-ep59 specifically recognized tumor-associated EpCAM and reached the cytosol by endosomal escape. In addition, the anticancer effect of RT22-ep59 was observed in the high-EpCAM-expressing pancreatic cancer cells and gemcitabine-resistant pancreatic cancer cells, but it had little effect on the low-EpCAM-expressing pancreatic cancer cells. Additionally, co-treatment with RT22-ep59 and gemcitabine synergistically inhibited cell viability, migration, and invasion in 3D-cultures and exhibited synergistic anticancer activity by inhibiting the RAF/ERK or PI3K/AKT pathways in cells with high-EpCAM expression. In an orthotopic mouse model, combined administration of RT22-ep59 and gemcitabine significantly inhibited tumor growth. Furthermore, the co-treatment suppressed cancer metastasis by blocking EMT signaling in vitro and in vivo. Our results demonstrated that RT22-ep59 synergistically increased the antitumor activity of gemcitabine by inhibiting RAS signaling by specifically targeting KRAS. This indicates that co-treatment with RT22-ep59 and gemcitabine might be considered a potential therapeutic strategy for pancreatic cancer patients harboring KRAS mutation.