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The Journal of biological chemistry20210101Vol.296issue()

液液相分離凝縮液を溶解するために一般的に使用される1,6-ヘキサンジオールは、キナーゼおよびホスファターゼ活性を直接損なう

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文献タイプ:
  • Journal Article
  • Research Support, Non-U.S. Gov't
概要
Abstract

液液相分離(LLP)の概念は、細胞内の膜のないコンパートメントの組織のための興味深いメカニズムとして浮上しています。アルコール1,6-ヘキサンジオールは、多様な分野で相分離研究でLLPSアセンブリを溶解するためのコントロールとして広く使用されています。しかし、1,6-ヘキサンジオールの潜在的な副作用についてはほとんど知られていないため、データの解釈を損ない、科学的議論を誤解させる可能性があります。この問題を調べるために、in vitroでのさまざまな酵素の活性に対する1,6-ヘキサンジオールの効果を分析しました。すでに1%の体積濃度で、1,6-ヘキサンジオールはキナーゼとホスファターゼを強く損ない、DNAポリメラーゼを部分的にブロックしましたが、DNase活性には影響しませんでした。通常、LLP液滴(5〜10%)を溶解するために使用される濃度では、キナーゼとホスファターゼの両方が事実上不活性でした。細胞におけるタンパク質リン酸化の広範な機能を考えると、我々のデータは、相分離研究における1,6-ヘキサンジオールの慎重なレビューを主張しています。

液液相分離(LLP)の概念は、細胞内の膜のないコンパートメントの組織のための興味深いメカニズムとして浮上しています。アルコール1,6-ヘキサンジオールは、多様な分野で相分離研究でLLPSアセンブリを溶解するためのコントロールとして広く使用されています。しかし、1,6-ヘキサンジオールの潜在的な副作用についてはほとんど知られていないため、データの解釈を損ない、科学的議論を誤解させる可能性があります。この問題を調べるために、in vitroでのさまざまな酵素の活性に対する1,6-ヘキサンジオールの効果を分析しました。すでに1%の体積濃度で、1,6-ヘキサンジオールはキナーゼとホスファターゼを強く損ない、DNAポリメラーゼを部分的にブロックしましたが、DNase活性には影響しませんでした。通常、LLP液滴(5〜10%)を溶解するために使用される濃度では、キナーゼとホスファターゼの両方が事実上不活性でした。細胞におけるタンパク質リン酸化の広範な機能を考えると、我々のデータは、相分離研究における1,6-ヘキサンジオールの慎重なレビューを主張しています。

The concept of liquid-liquid phase separation (LLPS) has emerged as an intriguing mechanism for the organization of membraneless compartments in cells. The alcohol 1,6-hexanediol is widely used as a control to dissolve LLPS assemblies in phase separation studies in diverse fields. However, little is known about potential side effects of 1,6-hexanediol, which could compromise data interpretation and mislead the scientific debate. To examine this issue, we analyzed the effect of 1,6-hexanediol on the activities of various enzymes in vitro. Already at 1% volume concentration, 1,6-hexanediol strongly impaired kinases and phosphatases and partly blocked DNA polymerases, while it had no effect on DNase activity. At concentrations that are usually used to dissolve LLPS droplets (5-10%), both kinases and phosphatases were virtually inactive. Given the widespread function of protein phosphorylation in cells, our data argue for a careful review of 1,6-hexanediol in phase separation studies.

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