異常な子宮頸部細胞球塗抹標本における子宮頸がんバイオマーカーP16およびKI67の役割

はじめに：子宮頸がんはインドで最も一般的な癌です。子宮頸がんのスクリーニングは、浸潤性頸がんの著しい減少に役立ちます。高品位の上皮内病変（ASC-H）を除外したPapanicolaouサイトロジー（PAP塗抹標本）および高リスクのヒトパピローマウイルス（HR-HPV）の感度が低いことは、コルポスコピー誘導生物視聴への不必要な紹介につながります。組み合わせた頸部サイトロジースクリーニングとHR-HPVには独自の制限があり、さらに標準化が必要です。P16やKi-67での染色などの追加のバイオマーカーを使用すると、異常なパップ塗抹標本のトリアージングに役立つ可能性があります。 材料と方法：病理学部と協力して、産婦人科で16か月間にわたって前向きな横断的研究が実施されました。軽度の細胞学的異型の場合の重大な病変の存在を予測する際に、p16/Ki-67による免疫染色の有効性を知るために研究が行われました。PAP塗抹標本（従来型およびLBC）とP16、KI-67、および利用可能な生検とともに相関していました。 結果：液体ベースの細胞診（LBC）は2134症例で行われ、そのうち46症例は[未定の有意性（ASCUS）の22の非定型扁平上皮細胞、3つの低悪性度扁平上皮内病変（LSIL）、8などの異常な細胞学的所見を示しました。非定型扁平上皮細胞は、高悪性度病変（ASC-H）、6つの高悪性度扁平上皮内病変（HSIL）、5つの扁平上皮癌（SCC）、2腺癌、1つの未整形腺細胞（AGUS）の1つの非定型腺細胞を排除できません。P16およびKI-67による免疫染色は、異常な細胞療法塗抹標本の38例で実施されました。38の異常な細胞診のうち、28症例がP16とKI-67の両方の共染色を示していました。これは、細胞の真のHPV感染を示唆しています。38症例のうち、07/14 ASCUS、06/06 HSIL、07/08 ASC-H、05/05扁平上皮癌、02/02腺癌もP16およびKI-67に対して二重陽性を示しました。Agusの1つの症例が診断されましたが、塗抹標本は免疫細胞化学的評価に不十分であり、研究から除外されました。LSILの3つの症例も細胞学的評価で診断され、そのうち1症例は免疫細胞化学（ICC）のp16およびKi-67の陽性を示しました。ASC-USグループでは、CIN2+病変の診断における免疫染色の感度と特異性は87.51％であり、LSILグループでは、CIN2+病変の診断における免疫染色の感度と特異性は100％でした。P16/KI-67陽性は、細胞学的重症度とともにも増加し、これは組織学的所見に対応しました。HSILとSCCの両方のカテゴリでASC-USの50％から100％に達しました。 結論：P16およびKI67によるこの免疫染色は、高感度と特異性の値を考慮して、ASC-USおよびLSILグループのトリアーングにおける有用な方法になります。

INTRODUCTION: Cervical cancer is the most common cancer in India. Screening for cervical cancer helps in marked reduction of invasive cervical cancers. The low sensitivity of Papanicolaou cytology (Pap smear) and high-risk human papillomavirus (HR-HPV) in excluding high-grade intraepithelial lesion (ASC-H) leads to unnecessary referrals to colposcopy-guided biopsy. The combined cervical cytology screening and HR-HPV have its own limitations and still need further standardization. Using additional biomarkers like staining with p16 and Ki-67 might help in triaging abnormal pap smear. MATERIALS AND METHODS: A prospective, cross-sectional study was performed over a period of 16 months in the Department of Obstetrics and Gynaecology, in collaboration with Department of Pathology. Study was conducted to know the efficacy of immunostaining with p16/Ki-67 in predicting the presence of significant lesion in cases of mild cytological atypia. PAP smears (conventional and LBC) along with P16, Ki-67 and available biopsies were correlated. RESULTS: Liquid-based cytology (LBC) was done in 2134 cases, out of which 46 cases showed abnormal cytological findings such as [22 atypical squamous cells of undetermined significance (ASCUS), 3 low-grade squamous intraepithelial lesion (LSIL), 8 atypical squamous cells cannot exclude high-grade lesion (ASC-H), 6 high-grade squamous intraepithelial lesion (HSIL), 5 squamous cell carcinoma (SCC), 2 adenocarcinoma, 1 atypical glandular cells of undetermined significance (AGUS)]. Immunostaining with p16 and Ki-67 was performed on 38 cases of abnormal cytological smears. Out of 38 abnormal cytology cases, 28 cases had shown co-staining for both p16 and Ki-67, suggestive of true HPV infection of the cells. Of the 38 cases, 07/14 ASCUS, 06/06 HSIL, 07/08 ASC-H, 05/05 squamous cell carcinoma and 02/02 adenocarcinoma also showed dual positivity for p16 and Ki-67. One case of AGUS was diagnosed, but the smear was unsatisfactory for immunocytochemical evaluation and excluded from the study. Three cases of LSIL were also diagnosed on cytological evaluation, and 1 of them however showed positivity for p16 and Ki-67 on immunocytochemistry (ICC). In the ASC-US group, the sensitivity and specificity of the immunostaining in diagnosing CIN2 + lesions were 87.51%, and in LSIL group, the sensitivity and specificity of the immunostaining in diagnosing CIN2 + lesions were 100%. p16/Ki-67 positivity also increased with cytological severity which in turn corresponded with histological findings: it reached from 50% in ASC-US to 100% in both HSIL and SCC categories. CONCLUSION: This immunostaining with p16 and Ki67 can be a useful method in the triaging of the ASC-US and the LSIL group as considering the high sensitivity and specificity values.