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背景：ヒト臍帯（HUC-MSC）に由来する間葉系幹細胞には、新しいコロナウイルス疾患2019（Covid-19）を治療することに興味のある免疫調節特性があります。Leng et al。最近、1人のドナーに由来するHUC-MSCは、ウイルス感染の重要なタンパク質であるアンジオテンシン変換酵素2（ACE2）と膜貫通セリンプロテアーゼ2（TMPRSS2）を否定的に発現したことを報告しました。この研究の目的は、SARS-COV-2の宿主であることができないことを示すために、分子ベースの技術を使用して複数のドナーに由来するHUC-MSCSロットにおけるACE2およびTMPRSS2の発現を定量化することでした。 方法：ACE2およびTMPRSS2の発現は、24種類のドナーを使用した定量的ポリメラーゼ連鎖反応（QPCR）、ウエスタンブロット、免疫蛍光、フローサイトメトリーを介してウォートンのゼリーに由来する24のロットHUC-MSCで分析されました。 結果：HUC-MSCは、ウエスタンブロット分析のヒト肺組織ホモジネートと比較して、ACE2（P = 0.002）およびTMPRSS2（P = 0.008）の発現が有意に低かった。QPCRによるHUC-MSCではACE2の発現はほとんどまたは観察されず、HUC-MSC細胞膜の免疫蛍光では観察できませんでした。95.3％±15.55の陰性ACE2およびTMPRSS2の人口率は、フローサイトメトリーを介してHUC-MSCで得られ、4.6％ACE2および29.5％TMPRSS2の観察可能な陽性集団のみが得られました。 結論：24ロットのHUC-MSCでACE2の負の発現とTMPRSS2の低い発現を実証しました。これは、HUC-MSCがウイルス感染を「かわす」ために免疫調節効果を発揮する能力を持つため、Covid-19の将来の治療オプションの設計に重要な意味を持ちます。
背景：ヒト臍帯（HUC-MSC）に由来する間葉系幹細胞には、新しいコロナウイルス疾患2019（Covid-19）を治療することに興味のある免疫調節特性があります。Leng et al。最近、1人のドナーに由来するHUC-MSCは、ウイルス感染の重要なタンパク質であるアンジオテンシン変換酵素2（ACE2）と膜貫通セリンプロテアーゼ2（TMPRSS2）を否定的に発現したことを報告しました。この研究の目的は、SARS-COV-2の宿主であることができないことを示すために、分子ベースの技術を使用して複数のドナーに由来するHUC-MSCSロットにおけるACE2およびTMPRSS2の発現を定量化することでした。 方法：ACE2およびTMPRSS2の発現は、24種類のドナーを使用した定量的ポリメラーゼ連鎖反応（QPCR）、ウエスタンブロット、免疫蛍光、フローサイトメトリーを介してウォートンのゼリーに由来する24のロットHUC-MSCで分析されました。 結果：HUC-MSCは、ウエスタンブロット分析のヒト肺組織ホモジネートと比較して、ACE2（P = 0.002）およびTMPRSS2（P = 0.008）の発現が有意に低かった。QPCRによるHUC-MSCではACE2の発現はほとんどまたは観察されず、HUC-MSC細胞膜の免疫蛍光では観察できませんでした。95.3％±15.55の陰性ACE2およびTMPRSS2の人口率は、フローサイトメトリーを介してHUC-MSCで得られ、4.6％ACE2および29.5％TMPRSS2の観察可能な陽性集団のみが得られました。 結論：24ロットのHUC-MSCでACE2の負の発現とTMPRSS2の低い発現を実証しました。これは、HUC-MSCがウイルス感染を「かわす」ために免疫調節効果を発揮する能力を持つため、Covid-19の将来の治療オプションの設計に重要な意味を持ちます。
BACKGROUND: Mesenchymal stem cells derived from human umbilical cord (hUC-MSCs) have immunomodulatory properties that are of interest to treat novel coronavirus disease 2019 (COVID-19). Leng et al. recently reported that hUC-MSCs derived from one donor negatively expressed Angiotensin-Converting Enzyme 2 (ACE2), a key protein for viral infection along with Transmembrane Serine Protease 2 (TMPRSS2). The purpose of this study was to quantify the expression of ACE2 and TMPRSS2 in hUC-MSCs lots derived from multiple donors using molecular-based techniques in order to demonstrate their inability to be a host to SARS-CoV-2. METHODS: Expression of ACE2 and TMPRSS2 was analyzed in 24 lots of hUC-MSCs derived from Wharton's jelly via quantitative polymerase chain reaction (qPCR), Western Blot, immunofluorescence and flow cytometry using 24 different donors. RESULTS: hUC-MSCs had significantly lower ACE2 (p = 0.002) and TMPRSS2 (p = 0.008) expression compared with human lung tissue homogenates in Western blot analyses. Little to no expression of ACE2 was observed in hUC-MSC by qPCR, and they were not observable with immunofluorescence in hUC-MSCs cell membranes. A negative ACE2 and TMPRSS2 population percentage of 95.3% ± 15.55 was obtained for hUC-MSCs via flow cytometry, with only 4.6% ACE2 and 29.5% TMPRSS2 observable positive populations. CONCLUSIONS: We have demonstrated negative expression of ACE2 and low expression of TMPRSS2 in 24 lots of hUC-MSCs. This has crucial implications for the design of future therapeutic options for COVID-19, since hUC-MSCs would have the ability to "dodge" viral infection to exert their immunomodulatory effects.
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