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侵略的な斑点のある翼のショウジョウバエ、ショウジョウバエ鈴木(松村)(双pt目:ショウジョウバエ科)は、果物産業に深刻な経済的損失を引き起こしました。従来の制御方法には多くの制限があり、CRISPR/CAS9を介した遺伝子駆動などの遺伝子工学技術は有望なアプローチです。CRISPR/CAS9システムでは、転写調節要素がGRNAの活性において重要な役割を果たします。したがって、D。SuzukiiのCRISPR/CAS9システムのゲノム編集効率を改善するために、4つの内因性U6プロモーターをクローン化してテストして、白い遺伝子の突然変異誘発を促進しました。我々の結果は、4つのプロモーターすべてが可変効率で使用できることを示しました。プロモーターDSU6-3は、4つのDSU6プロモーターの中で最も高いゲノム編集効率を持っていました。DSU6-3プロモーターと比較して、DMU6:3プロモーターは、D。Suzukiiの突然変異誘発を促進する効率が低いことを示しました。これらの発見は、D。SuzukiiでGRNAを発現するために利用可能なプロモーターの範囲を拡大し、この重要な害虫に関する基本的および応用研究を促進します。
侵略的な斑点のある翼のショウジョウバエ、ショウジョウバエ鈴木(松村)(双pt目:ショウジョウバエ科)は、果物産業に深刻な経済的損失を引き起こしました。従来の制御方法には多くの制限があり、CRISPR/CAS9を介した遺伝子駆動などの遺伝子工学技術は有望なアプローチです。CRISPR/CAS9システムでは、転写調節要素がGRNAの活性において重要な役割を果たします。したがって、D。SuzukiiのCRISPR/CAS9システムのゲノム編集効率を改善するために、4つの内因性U6プロモーターをクローン化してテストして、白い遺伝子の突然変異誘発を促進しました。我々の結果は、4つのプロモーターすべてが可変効率で使用できることを示しました。プロモーターDSU6-3は、4つのDSU6プロモーターの中で最も高いゲノム編集効率を持っていました。DSU6-3プロモーターと比較して、DMU6:3プロモーターは、D。Suzukiiの突然変異誘発を促進する効率が低いことを示しました。これらの発見は、D。SuzukiiでGRNAを発現するために利用可能なプロモーターの範囲を拡大し、この重要な害虫に関する基本的および応用研究を促進します。
The invasive spotted-wing drosophila, Drosophila suzukii (Matsumura) (Diptera: Drosophilidae) has caused serious economic losses to the fruit industry. The conventional control methods have many limitations and genetic engineering technologies such as CRISPR/Cas9-mediated gene drive are promising approaches. In the CRISPR/Cas9 system, the transcriptional regulatory elements play an important role in the activities of gRNA. Thus, in order to improve the genome editing efficiency of the CRISPR/Cas9 system in D. suzukii, we cloned and tested four endogenous U6 promoters to drive mutagenesis of the white gene. Our results showed that all the four promoters could be used with variable efficiency. The promoter DsU6-3 had the highest genome editing efficiency among the four DsU6 promoters. Compared with the DsU6-3 promoter, the DmU6:3 promoter showed lower efficiency to drive mutagenesis in D. suzukii. These findings expand the range of promoters available to express gRNAs in D. suzukii, facilitating the basic and applied research on this important pest.
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