嚢胞性エキノカコ症の診断のために、Protein A結合キトサンゴールドナノ粒子を使用した光学バイオセンサーの開発

人間のエキノコッコーシスは、世界の多くの地域の何百万人もの人々に依然として影響を与えている深刻な寄生虫疾患です。人々の健康に重大な脅威を提供できるため、検出のための迅速で便利な経済的な方法を発見することが重要です。ここでは、嚢胞性エキノ腫症（ヒダチドーシス）の診断のための免疫ドットブロットアッセイの強化された新しいケアアッセイ、すなわち提案されています。この方法は、抗AG B抗体を保持するゴールドナノプローブ（キトサンゴールドナノパルティクルプロテインA）と水力嚢胞抗原（AG B）の間のサンドイッチ複合体の形成に基づいています。簡単に言えば、タンパク質Aをグルタルアルデヒド化学を介してキトサンゴールドナノ粒子に共役しました。次に、Ag Bをニトロセルロース膜の表面に固定化し、その後、血清サンプルと金ナノプローブの添加が続きました。正の信号は、肉眼で簡単に検出できました。このバイオセンサーのシグナル強度は、ナノ粒子の表面上の活性抗キノコッカス顆粒菌抗体の濃度、血清サンプルの抗体の力価、ニトロセルロース膜でコーティングされたAg Bの濃度に比例しました。タンパク質Aを使用するための最小濃度は、ニトロセルロース膜でコーティングされたAg Bの濃度をそれぞれ0.5および0.3 mg/mlでした。この強化された免疫ドットブロットアッセイは、エキノカコシスの診断のために高価な機器を必要とせずに、簡単な診断技術を提供します。

Human echinococcosis is a serious parasitic diseasethat still affects millions of people in many parts of the world. Since it can offer a critical threat to people's health, it is important to discover a rapid, convenient, and economical method for detection. Herein, we propose a novel point of care assay, namely, an enhanced immuno-dot-blot assay for diagnosis of cystic echinococcosis (hydatidosis). This method is based on the formation of a sandwich complex between a goldnanoprobe (chitosan-gold nanoparticleprotein A) and hydatid cyst antigen (Ag B), which holds anti-Ag B antibodies. Briefly, protein A was conjugated to chitosan-gold nanoparticles via glutaraldehyde chemistry. Then, Ag B was immobilized on the surface of a nitrocellulose membrane, which was followed by the addition of the sera sample and gold nanoprobes. The positive signals were easily detectable by naked eye. The signal intensity of this biosensor was proportional to the concentration of active anti-Echinococcus granulosus antibodies on the surface of the nanoparticles, titer of antibodies in the sera samples, and concentration of Ag B coated on the nitrocellulose membrane. The minimum concentration to use the protein A for conjugation to detect titer of anti-Echinococcus IgGand the concentration of Ag B coated in nitrocellulose membrane were 0.5 and 0.3 mg/mL, respectively. This enhanced immuno-dot-blot assay offers a simple diagnostic technique withoutthe need for expensive equipment for diagnosis of echinococcosis.