P糖タンパク質を介した脳血管内皮細胞の人身売買の研究の研究

アネモンraddeana regelから分離された天然のトリテルペノイドの1つとして、ラドデアニンA（RA）は、特に膠芽腫の発症とヒト脳の成長のために、複数の腫瘍形成に対する治療効果があることが確認されています。ただし、これが発生するメカニズムは、脳血の障壁（BBB）を介したRAの血管内皮輸送ルーチンの観点から、あまり理解されていないままです。そのような答えを求めるために、ヒト脳微小環境内皮細胞（HBMEC）を使用して、in vitroで微小環境を刺激し、RAの細胞内蓄積を探索しました。この実験の結果は、RAがそのような細胞に対して比較的中程度の輸送親和性を持っていることを示しています。運動パラメーターkmは37.01±2.116μmで、Vmaxは9.412±0.1375 nm/min/mgのタンパク質でした。興味深いことに、P糖タンパク質（P-GP、ABCB1/MDR1）のタンパク質ダウンレギュレーションは、RA膜貫通活性を有意に活性化しました。これは、P-GPがRA細胞輸送の原因であることを証明しています。さらに、選択的非特異的阻害剤であるLy335979は、トランスポーターの機能を制限するが、危険性のある細胞膜タンパク質を制限することにより、P-gp、ジゴキシン、細胞内蓄積のRAまたは古典的な基質のいずれかを増加させました。さらに、P-GPの発現または活性の減少は、HBMECに対するRA薬物耐性を引き起こしました。要約すると、我々のデータは、p-gpの発現と機能の両方がすべて、脳血管内皮細胞を介したRA膜貫通の人身売買に必要であることを示しました。この研究は、薬物BBB浸透中のRA輸送とP-gpの変動の間の接続の存在に関する重要な証拠を提供します。また、人間の脳におけるRAの薬力学的効果に関するいくつかの重要なガイダンスを示唆しています。

As one of the natural triterpenoids isolated from Anemone Raddeana Regel, Raddeanin A (RA) has been confirmed to possess therapeutic effects against multiple tumorigeneses, especially for the onset of glioblastoma and growth in human brains. However, the mechanism by which this happens remains poorly understood in terms of the vascular endothelium trafficking routine of RA through the brain-blood barrier (BBB). To seek such answers, human brain microenvironment endothelial cells (HBMECs) were used to stimulate the microenvironment in vitro, and to explore the intracellular accumulation of RA. The results of this experiment illustrated that RA has a relative moderate transport affinity for such cells. The kinetic parameter Km was 37.01 ± 2.116 μM and Vmax was 9.412 ± 0.1375 nM/min/mg of protein. Interestingly, protein downregulation of P-glycoprotein (P-gp, ABCB1/MDR1) significantly activated RA transmembrane activity, which proves that P-gp is responsible for RA cellular trafficking. In addition, the selective non-specific inhibitor, LY335979 increased either RA or the classical substrate of P-gp, digoxin, intracellular accumulation by restricting the transporter's function but without jeopardizing cytomembrane proteins. Moreover, a decrease in the expression or activity of P-gp triggered RA drug resistance to HBMECs. In summary, our data showed that both the expression and function of P-gp are all necessary for RA transmembrane trafficking through cerebrovascular endothelial cells. This study provides significant evidence for the presence of a connection between RA transport and P-gp variation during drug BBB penetration. It is also suggesting some vital guidance on the RA pharmacodynamic effect in human brains.