酸化グラフェンに基づいた敏感な蛍光アパセンサーの製造のための指数濃縮法によるリガンドの体系的な進化によるトラマドールのDNAアプタマーの選択

非定型オピオイドおよびコデインの4-フェニルピペリジン類似体としての塩酸トラマドール（TH）は、主に中程度から激しい痛みの治療に使用されます。その広範なアプリケーションのため、さまざまなサンプルでの分析の結果が不可欠です。現在の研究は、血清サンプル中のトラマドールの測定のために、グラフェン酸化物（GO）とアプタマーを使用した急速な蛍光アッセイの導入に焦点を当てています。THの特定のssDNAアプタマーは、蛍光消光剤としてGOを使用したSELEX（指数濃縮によるリガンドの系統的進化）技術によって開発されました。10ラウンド後、さまざまな家族から2つのアプタマー（APT19とAPT39）が選択されました。次に、アプタマーの結合定数を蛍光アッセイを使用して測定し、最終的にAPT39（ATTO 647Nで標識）を選択し、高親和性（kD = 178.4 nm）と特異性を持つこのアプタマーが結合したため、蛍光アパセンソルの開発のために選択されました。現在の分析システムは、それぞれ血清サンプルとリン酸緩衝液生理食塩水（10 mM PBS）で1.04 nmおよび2.56 nmの検出限界を示しました。

Tramadol hydrochloride (TH), as an atypical opioid and a 4-phenyl-piperidine analogue of codeine, is mainly used for treating moderate to severe pains. Due to its extensive application, the consequent need for its analysis in various samples is essential. The current study focuses on the introduction of a rapid fluorescent assay using graphene oxide (GO) and aptamer for determination of tramadol in serum samples. Specific ssDNA aptamers for TH were developed by SELEX (Systematic Evolution of Ligands by EXponential Enrichment) technique using GO as a fluorescence quencher. After 10 rounds, two aptamers (Apt19 and Apt39) were selected from various families. Then, the binding constants of aptamers were measured using fluorometric assay and finally Apt39 (labeled with ATTO 647N) was chosen for development of a fluorescent aptasensor because this aptamer bound to TH with high affinity (Kd = 178.4 nM) and specificity. The current analytical system showed detection limits of 1.04 nM and 2.56 nM in serum sample and phosphate buffer saline (10 mM PBS), respectively.