B細胞受容体レパートリーの特性評価によるピーナッツアレルギーと耐性の区別

背景：ピーナッツ2Sアルブミン（ARA H 2または6）に対する特定のIgEは、臨床的に関連するピーナッツ感作の最良の予測因子です。しかし、ピーナッツアレルギーのシゲレベルとピーナッツのレベルは、感作されたが耐性のある患者のレベルが部分的に重複しており、診断が不正確になり、その結果、不必要な食物制限を防ぐために診断を改善する必要性を強調しています。したがって、アレルギー性および感作で耐性のあるドナーからのピーナッツ2Sアルブミン特異的モノクローナル抗体（mAb）をコードするV（d）J遺伝子転写産物の違いを調査しようとしました。 方法：2Sアルブミン結合B細胞は、ピーナッツアレルギー（n = 6）の末梢血および耐性（n = 6）ドナーからARA H2および/または6（≥0.1ku/L）および非原性コントロール（n = 5）に耐性（n = 6）から分類されました。H 2および/または6（≥0.1ku/L）。対応するH重鎖および軽鎖遺伝子転写産物をMABSとして異種発現し、ネイティブARA H2および6。HCDR3配列モチーフに対する特異性をテストしました。 結果：2Sアルブミン結合B細胞の頻度は、耐性（中央値：0.006％）および非アトピックドナー（中央値：0.0015％、P = 0.008）と比較して、アレルギー（中央値：0.01％）で増加しました。MABの大部分（74％、29/39）は、特にARA H 2および/または6に結合しました。非固有のMAB（9/10）は、主に非原性コントロールに由来していました。アレルギードナーでは、重鎖遺伝子転写産物の89％がVH3ファミリー遺伝子で構成されていましたが、感作は54％しか、耐性があり、63％が非アトピックドナーの63％でした。さらに、特定のHCDR3シーケンスモチーフは、レベンシュテイン距離の階層的クラスタリング時にアレルギー（n = 4）または耐性（n = 3）に関連していました。 結論：ピーナッツアレルギーは、支配的なVH3ファミリー遺伝子の使用と特定の公共抗体配列（HCDR3モチーフ）に関連しています。

BACKGROUND: Specific IgE against a peanut 2S albumin (Ara h 2 or 6) is the best predictor of clinically relevant peanut sensitization. However, sIgE levels of peanut allergic and those of peanut sensitized but tolerant patients partly overlap, highlighting the need for improved diagnostics to prevent incorrect diagnosis and consequently unnecessary food restrictions. Thus, we sought to explore differences in V(D)J gene transcripts coding for peanut 2S albumin-specific monoclonal antibodies (mAbs) from allergic and sensitized but tolerant donors. METHODS: 2S albumin-binding B-cells were single-cell sorted from peripheral blood of peanut allergic (n=6) and tolerant (n=6) donors sensitized to Ara h2 and/or 6 (≥ 0.1 kU/l) and non-atopic controls (n=5). h 2 and/or 6 (≥ 0.1 kU/l). Corresponding h heavy and light chain gene transcripts were heterologously expressed as mAbs and tested for specificity to native Ara h2 and 6. HCDR3 sequence motifs were identified by Levenshtein distances and hierarchically clustering. RESULTS: The frequency of 2S albumin-binding B cells was increased in allergic (median: 0.01%) compared to tolerant (median: 0.006%) and non-atopic donors (median: 0.0015%, p = 0.008). The majority of mAbs (74%, 29/39) bound specifically to Ara h 2 and/or 6. Non-specific mAbs (9/10) were mainly derived from non-atopic controls. In allergic donors, 89% of heavy chain gene transcripts consisted of VH3 family genes, compared with only 54% in sensitized but tolerant and 63% of non-atopic donors. Additionally, certain HCDR3 sequence motifs were associated with allergy (n = 4) or tolerance (n = 3) upon hierarchical clustering of their Levenshtein distances. CONCLUSIONS: Peanut allergy is associated with dominant VH3 family gene usage and certain public antibody sequences (HCDR3 motifs).