PLYC連鎖球菌バクテリオファージエンドリシンによるグループA炭水化物骨格骨の認識の分子基盤

エンドリシンは、複製サイクルの終わりに子孫ファージを放出するバクテリオファージ（ファージ）溶解系の一部として機能するペプチドグリカン（PG）ヒドロラーゼです。特に、エンドリシンのみがファージ感染なしに溶解を引き起こす可能性があります。これは、従来の抗生物質の魅力的な代替品を提供します。グラム陽性細菌宿主に感染するファージからのエンドリシンには、PG結合の加水分解の原因となる少なくとも1つの酵素的に活性なドメイン（EAD）と、表面炭水化物などの細胞壁エピトープを結合する細胞壁結合ドメイン（CBD）が含まれています。エンドリシンの特異性の程度。EADSは通常、明確に定義されたアクティブサイトを持つ保存された機械的クラスに集中しますが、CBDの性質についてはほとんど知られておらず、CBDのいくつかの結合エピトープのみが解明されています。多くの連鎖球菌の主要な細胞壁成分は、種特異的および血清型特異的グリコシル側鎖で修飾されたポリルハムノース（PRHA）バックボーンを含む多糖類です。このレポートでは、分子遺伝学、顕微鏡検査、フローサイトメトリー、溶解活性アッセイを使用して、細胞壁多糖類のPRHAバックボーンとStreptococcal PlycエンドリシンのCBDサブユニットであるPLYCBの相互作用を示し、炭水化物（GAC）とグループAの相互作用を示します。それぞれ血清型C特異的炭水化物（SCC）は、グループA連鎖球菌および連鎖球菌ミュータン群によって発現しました。

Endolysins are peptidoglycan (PG) hydrolases that function as part of the bacteriophage (phage) lytic system to release progeny phage at the end of a replication cycle. Notably, endolysins alone can produce lysis without phage infection, which offers an attractive alternative to traditional antibiotics. Endolysins from phage that infect Gram-positive bacterial hosts contain at least one enzymatically active domain (EAD) responsible for hydrolysis of PG bonds and a cell wall binding domain (CBD) that binds a cell wall epitope, such as a surface carbohydrate, providing some degree of specificity for the endolysin. Whilst the EADs typically cluster into conserved mechanistic classes with well-defined active sites, relatively little is known about the nature of the CBDs and only a few binding epitopes for CBDs have been elucidated. The major cell wall components of many streptococci are the polysaccharides that contain the polyrhamnose (pRha) backbone modified with species-specific and serotype-specific glycosyl side chains. In this report, using molecular genetics, microscopy, flow cytometry and lytic activity assays, we demonstrate the interaction of PlyCB, the CBD subunit of the streptococcal PlyC endolysin, with the pRha backbone of the cell wall polysaccharides, Group A Carbohydrate (GAC) and serotype c-specific carbohydrate (SCC) expressed by the Group A Streptococcus and Streptococcus mutans, respectively.