ハカイは、M6A mRNAメチル化機械のコア成分の安定化に必要です

N6-メチルアデノシン（M6A）は、mRNA代謝のほとんどのステップに影響を及ぼし、いくつかの生物学的機能に関与するmRNAの最も豊富な内部修飾です。E3ユビキチンリガーゼハカイは、以前は植物および哺乳類細胞におけるM6Aメチル化機械の成分と複合的に発見されましたが、その正確な機能は調査されたままでした。ここでは、ハカイがショウジョウバエおよびヒト細胞のメチルトランスフェラーゼ複合体の保存成分であることを示します。ショウジョウバエでは、その枯渇はM6Aレベルの低下と性決定を含むM6A依存性機能の変化をもたらします。そのユビキチン化ドメインは、M6A機構の他のメンバーとの二量体化と相互作用に必要であるが、その触媒活性は不可欠であることを示します。最後に、ハカイの喪失がメチルトランスフェラーゼ複合体のいくつかのサブユニットを不安定にし、M6A沈着障害をもたらすことを実証します。私たちの研究は、M6A mRNAライターコンプレックスのメカニズムに機能的および分子的洞察を追加します。

N6-methyladenosine (m6A) is the most abundant internal modification on mRNA which influences most steps of mRNA metabolism and is involved in several biological functions. The E3 ubiquitin ligase Hakai was previously found in complex with components of the m6A methylation machinery in plants and mammalian cells but its precise function remained to be investigated. Here we show that Hakai is a conserved component of the methyltransferase complex in Drosophila and human cells. In Drosophila, its depletion results in reduced m6A levels and altered m6A-dependent functions including sex determination. We show that its ubiquitination domain is required for dimerization and interaction with other members of the m6A machinery, while its catalytic activity is dispensable. Finally, we demonstrate that the loss of Hakai destabilizes several subunits of the methyltransferase complex, resulting in impaired m6A deposition. Our work adds functional and molecular insights into the mechanism of the m6A mRNA writer complex.