アドリアマイシン腎症ラットモデルにおける糸球体超微細構造およびポドサイト損傷に対するインターロイキン-17遺伝子の効果

この研究の目的は、アドリアマイシン（ADM）腎症（ADM）に苦しむラットの腎組織におけるインターロイキン-17（IL-17）遺伝子のメカニズムと、ポドカリキシンやネフリンなどの特徴的なタンパク質の発現レベルに対するその効果を調査することでした。足細胞。Sprague-Dawley（SD）ラットは、ランダムに対照群（通常の生理食塩水で処理）とADM群（アドリアマイシンで処理）に分割しました。ADMモデルラットにレンチウイルスをトランスフェクトし、トランスフェクション基（組換えプラスミドIL-17-SHRNAをトランスフェクト）および陰性対照群（プラスミドSHNCをトランスフェクト）に分割しました。クーマシーブリリアントブルーG-250（CBB）メソッドを採用して、尿中のアルブミンのレベルを検出してモデルを検証しました。ラット糸球体の超微細構造が観察され、Tヘルパー17細胞/調節T細胞（TH17/TREG）の比は、フローサイトメトリー（FCM）によって測定されました。IL-17、フォークヘッドボックスP3（FOXP3）、ネフリン、およびポドカリキシンの発現レベルは、リアルタイムの定量PCR（RT-QPCR）およびウエスタンブロット分析によって検出されました。この研究の結果は、ADMグループのタンパク尿含有量が対照群のそれよりも有意に高いことを示した（P <0.05）。ADM群では、糸球体基底膜は不均一な厚さと不完全な構造を持ち、フットプロセスの融合と電子密度の蓄積を示しました。しかし、トランスフェクトされたラットの糸球体基底膜は薄くて無傷であり、少量の上皮足プロセスの融合と電子密度の蓄積が観察されました。ADMグループのTh17細胞とIL-17レベルの割合は対照群の割合よりも有意に高かったが、Treg細胞、Foxp3、ネフリン、およびポドカリキシンレベルの割合は対照群の割合よりも有意に低かった（P <<0.05）。トランスフェクショングループのTh17細胞、IL-17、ネフリン、およびポドカリキシンの割合は、ADMグループおよび陰性対照群の割合よりも有意に高かったのに対し、Treg細胞とFOXP3の割合はADMグループの割合よりも有意に低かったネガティブコントロールグループ（P <0.05）。この研究の結果は、Th17/IL-17細胞の異常な活性化が足細胞損傷を引き起こし、ADM腎症の発生と進行を促進することを示しました。さらに、IL-17遺伝子発現の阻害は、Th17およびTreg細胞の数の不均衡を改善する可能性があり、これは原発性腎症候群（PNS）患者の治療に潜在的に適用される可能性があります。

The aim of this study was to investigate the mechanism of interleukin-17 (IL-17) gene in renal tissues of rats suffering from adriamycin (ADM) nephropathy and its effect on the expression level of characteristic proteins, such as Podocalyxin and Nephrin, in podocytes. Sprague-Dawley (SD) rats were randomly divided into a control group (treated with normal saline) and an ADM group (treated with adriamycin). ADM model rats were transfected with lentivirus and divided into a transfection group (transfected with recombinant plasmid IL-17-shRNA) and a negative control group (transfected with plasmid shNC). Coomassie brilliant blue G-250 (CBB) method was adopted to detect the levels of albumin in urine to validate the model. The ultrastructure of rat glomeruli was observed, and the ratio of T helper 17 cells/regulatory T cells (Th17/Treg) was measured by flow cytometry (FCM). The expression levels of IL-17, forkhead box P3 (Foxp3), Nephrin, and Podocalyxin were detected by real-time quantitative PCR (RT-qPCR) and western blot analysis. Results of the study showed that the proteinuria content of the ADM group was significantly higher than that of the control group (P<0.05). In the ADM group, the glomerular basement membrane had uneven thickness and incomplete structure, which showed foot process fusion and electron dense accumulation. However, the glomerular basal membrane in the transfected rats was thin and intact, and a small amount of epithelial foot process fusion and electron density accumulation were observed. The percentages of Th17 cells and IL-17 levels in the ADM group were significantly higher than those in the control group, while the percentages of Treg cells, Foxp3, Nephrin, and Podocalyxin levels were significantly lower than those in the control group (P<0.05). The percentages of Th17 cells, IL-17, Nephrin, and Podocalyxin in the transfection group were significantly higher than those in the ADM group and the negative control group, while the percentages of Treg cells and Foxp3 were significantly lower than those in the ADM group and the negative control group (P<0.05). The results of this study showed that abnormal activation of Th17/IL-17 cells caused podocyte injury and promoted the occurrence and progression of ADM nephropathy. In addition, inhibition of IL-17 gene expression could improve the imbalance of number of Th17 and Treg cells, which may be potentially applied in treatment of patients with primary nephrotic syndrome (PNS).