非レトロウイルスRNAをビリオンに包装するのに十分なマウスレトロウイルスのシグナルの識別

モロニーマウス白血病ウイルス（MOMLV）の5 '末端に近い領域は、ウイルスRNAをビリオンに包装するために必要です。MOMLVに基づいたレトロウイルスベクターが構築されており、親ウイルスの内部領域の大部分を除去したにもかかわらず、ビリオンに効率的にパッケージ化されています。パッケージングに十分なシーケンスをさらに局在化するために、MOMLVベースのレトロウイルスベクターからさまざまな断片を非レトロウイルス転写ユニットに挿入し、これらのコンストラクトをレトロウイルスパッキング細胞にトランスフェクトし、これらのコンストラクトからビリオンに転写されたRNAの包装を測定しました。これらのコンストラクトのいくつかからの転写産物は、少なくとも親のベクターまたはMOMLV自体からのものと同様にパッケージ化されました。効率的なRNAパッケージングには、長期ターミナルリピートまたはTRNA結合配列ではなく、GAG領域に拡張された配列が必要でした。インサートを含まないコンストラクトから転写されたRNA、またはインサートの方向が逆になったコンストラクトは、検出可能なレベルでパッケージ化されませんでした。これらの研究では、マウス白血病ウイルスRNAをビリオンにカプシド化するために必要かつ十分な配列を定義します。

A region near the 5' end of Moloney murine leukemia virus (MoMLV) is required for packaging of viral RNA into virions. Retroviral vectors based on MoMLV have been constructed that are also efficiently packaged into virions despite removal of most of the interior region of the parental virus. To further localize sequences which are sufficient for packaging, we inserted various fragments from an MoMLV-based retroviral vector into a nonretroviral transcription unit, transfected these constructs into retrovirus-packaging cells, and measured packaging of RNA transcribed from these constructs into virions. Transcripts from some of these constructs were packaged at least as well as those from the parental vector or MoMLV itself. Sequences extending into the gag region, but not the long terminal repeat or tRNA-binding sequences, were required for efficient RNA packaging. RNAs transcribed from constructs which did not contain an insert, or in which the orientation of the insert was reversed, were not packaged at detectable levels. These studies define sequences which are necessary and sufficient for encapsidation of murine leukemia virus RNA into virions.