ORMDL3の過剰発現は、RBL-2H3細胞における炎症誘発性サイトカインとタプシガルギン媒介PERKリン酸化のFCεRIを介した転写を促進します

はじめに：染色体領域17Q21は、ヒトオロソムコイド様3（ORMDL3）遺伝子を抱えており、喘息およびその他の炎症性疾患に関連しています。ORMDL3は、展開されたタンパク質応答（UPR）、脂質代謝、および炎症反応に関与しています。RBL-2H3細胞におけるORMDL3過剰発現の効果を調査して、炎症性疾患の発達へのORMDL3の寄与を決定しました。 方法：脱顆粒、インターロイキン-4（IL-4）、腫瘍壊死因子-α（TNF-α）、単球化学療法剤タンパク質-1（MCP-1）の転写アップレギュレーションを評価するために、oRMDL3を安定して過剰発現するRBL-2H3細胞を生成しました。FcεRIを介したマイトジェン活性化プロテインキナーゼ（MAPK）リン酸化。さらに、MAPK、プロテインキナーゼ様網膜キナーゼ（PERK）、およびイノシトール除去酵素1（ARE1）リン化合物を監視することにより、タプシガルギン（TG）を介した炎症誘発性サイトカイン転写およびUPRに対するORMDL3の過剰発現の効果を調べました。 結果：ORMDL3の過剰発現は、FCεRI架橋後にIL-4、TNF-α、およびMCP-1発現を促進しましたが、スフィンゴシン-1-リン酸（S1P）アゴニストFTY720はこの増強を抑制しました。ベクタートランスフェクトとOrmdl3過剰発現細胞の間のFCεRIを介した活性化を介した脱顆粒とMAPKリン酸化に有意な差はありませんでした。ORMDL3の過剰発現は、TGを介したPERKリン酸化を加速しましたが、MAPKリン酸化と炎症誘発性サイトカイン発現は、ORMDL3過剰発現細胞に有意な変化を示さなかった。 結論：我々の発見は、ORMDL3がS1P経路を介して炎症誘発性サイトカイン発現を調節する上で重要な役割を果たし、マスト細胞のUPR経路に選択的に影響することを示唆しています。

INTRODUCTION: The chromosomal region 17q21 harbors the human orosomucoid-like 3 (ORMDL3) gene and has been linked to asthma and other inflammatory diseases. ORMDL3 is involved in the unfolded protein response (UPR), lipid metabolism, and inflammatory reactions. We investigated the effects of ORMDL3 overexpression in RBL-2H3 cells to determine the contribution of ORMDL3 to inflammatory disease development. METHODS: We generated ORMDL3 stably overexpressing RBL-2H3 cells to assess degranulation, transcriptional upregulation of interleukin-4 (IL-4), tumor necrosis factor-α (TNF-α), monocyte chemoattractant protein-1 (MCP-1), and mitogen-activated protein kinase (MAPK) phosphorylation via FcεRI. In addition, we examined the effects of ORMDL3 overexpression on thapsigargin (TG)-mediated proinflammatory cytokine transcription and UPR by monitoring MAPK, protein kinase-like endoplasmic reticulum kinase (PERK), and inositol-requiring enzyme 1 (IRE1) phosphorylation. RESULTS: Overexpression of ORMDL3 enhanced IL-4, TNF-α, and MCP-1 expression after FcεRI cross-linking, whereas the sphingosine-1-phosphate (S1P) agonist FTY720 suppressed this enhancement. There was no significant difference in degranulation and MAPK phosphorylation via FcεRI-mediated activation between vector-transfected and ORMDL3-overexpressing cells. ORMDL3 overexpression accelerated TG-mediated PERK phosphorylation, while MAPK phosphorylation and proinflammatory cytokine expression showed no significant changes in ORMDL3-overexpressing cells. CONCLUSIONS: Our findings suggest that ORMDL3 plays an important role in regulating proinflammatory cytokine expression via the S1P pathway and selectively affects the UPR pathway in mast cells.