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目的：この研究の目的は、歯周バイオフィルムに対するLactobacillus reuteriの新規プロバイオティクス株によって生成されるロテリンの効果を評価することでした。 材料と方法：L。Reuteri LC382415（先住民族のインドネシア株）は、24時間、嫌気性条件で人間、Rogosa、Sharpe（MRS）寒天で培養されました。ロテリンを分離するために、L。ReuteriをMRSブイヨンの300 mmグリセロールに懸濁し、3時間嫌気性条件下でインキュベートし、上清画分をろ過した。ロテリンの存在は、ドデシル硫酸ナトリウム - ポリアクリルアミドゲル電気泳動（SDS-PAGE）によって確認され、その濃度が測定されました。ポルフィロモナスジンジバリスATCC 33277およびT. denticola ATCC 35405バイオフィルムに対するロテリンの効果を、バイオフィルムアッセイを使用して評価しました。バイオフィルムは、96ウェルマイクロプレートのバクテリアを48時間インキュベートすることにより形成されました。バイオフィルムで12.5、25、50、および100μg/mlのロテリン濃度で用量依存実験を実施しました。阻害効果は、1、3、6、および24時間で測定されました。バイオフィルム質量は490 nmで測定されました。統計分析では、一元配置分散分析を使用していました。 結果：SDS-PAGEアッセイにより、L。Reuteri株の培養上清中のロテリン（52 kDa）の存在が確認されました。12.5μg/mlという低い濃度のロテリンは、単一種および混合種のバイオフィルムを有意に阻害しました（P <0.05）。 結論：これは、歯周細菌に対するL. reuteri LC382415から分離されたロテリンの有望な効果を実証する最初の研究です。このアクティブコンポーネントのメカニズムを調査するために、さらなる研究が必要です。
目的：この研究の目的は、歯周バイオフィルムに対するLactobacillus reuteriの新規プロバイオティクス株によって生成されるロテリンの効果を評価することでした。 材料と方法：L。Reuteri LC382415（先住民族のインドネシア株）は、24時間、嫌気性条件で人間、Rogosa、Sharpe（MRS）寒天で培養されました。ロテリンを分離するために、L。ReuteriをMRSブイヨンの300 mmグリセロールに懸濁し、3時間嫌気性条件下でインキュベートし、上清画分をろ過した。ロテリンの存在は、ドデシル硫酸ナトリウム - ポリアクリルアミドゲル電気泳動（SDS-PAGE）によって確認され、その濃度が測定されました。ポルフィロモナスジンジバリスATCC 33277およびT. denticola ATCC 35405バイオフィルムに対するロテリンの効果を、バイオフィルムアッセイを使用して評価しました。バイオフィルムは、96ウェルマイクロプレートのバクテリアを48時間インキュベートすることにより形成されました。バイオフィルムで12.5、25、50、および100μg/mlのロテリン濃度で用量依存実験を実施しました。阻害効果は、1、3、6、および24時間で測定されました。バイオフィルム質量は490 nmで測定されました。統計分析では、一元配置分散分析を使用していました。 結果：SDS-PAGEアッセイにより、L。Reuteri株の培養上清中のロテリン（52 kDa）の存在が確認されました。12.5μg/mlという低い濃度のロテリンは、単一種および混合種のバイオフィルムを有意に阻害しました（P <0.05）。 結論：これは、歯周細菌に対するL. reuteri LC382415から分離されたロテリンの有望な効果を実証する最初の研究です。このアクティブコンポーネントのメカニズムを調査するために、さらなる研究が必要です。
OBJECTIVE: The aim of this study was to evaluate the effect of reuterin produced by a novel probiotic strain of Lactobacillus reuteri against periodontal biofilms. MATERIALS AND METHODS: L. reuteri LC382415 (an indigenous Indonesian strain) was cultured in Man, Rogosa, and Sharpe (MRS) agar in anaerobic conditions for 24 hours. To isolate reuterin, L. reuteri was suspended in 300-mM glycerol in MRS broth and incubated under anaerobic conditions for 3 hours, and the supernatant fraction was filtered. The presence of reuterin was confirmed by sodium dodecyl sulfate-polyacrylamide gel electrophoresis (SDS-PAGE), and its concentration was determined. The effect of reuterin on Porphyromonas gingivalis ATCC 33277 and T. denticola ATCC 35405 biofilms was evaluated using biofilm assays. Biofilms were formed by incubating bacteria in 96-well microplates for 48 hours. A dose-dependent experiment was performed with reuterin concentrations of 12.5, 25, 50, and 100 μg/mL on biofilms. The inhibitory effect was measured at 1, 3, 6, and 24 hours. The biofilm masses were measured at 490 nm. Statistical analysis was using one-way ANOVA. RESULTS: The SDS-PAGE assay confirmed the presence of reuterin (52 kDa) in the culture supernatant of the L. reuteri strain. Reuterin in a concentration as low as 12.5 μg/mL significantly inhibited single- and mixed-species biofilms (p < 0.05). CONCLUSIONS: This is the first study to demonstrate the promising effect of reuterin isolated from L. reuteri LC382415 against periodontal bacteria. Further studies are warranted to explore the mechanism of this active component.
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