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細胞ベースの治療は、損傷した部位に移植されたときに組織を修復する能力により、虚血性疾患の非常に有望な治療パラダイムです。これらの治療効果には、局所微小環境に応じて分泌される高レベルの生物活性分子に起因する強力なパラクリン成分が含まれます。したがって、分泌された治療は、in vitro培養中に細胞を前処理することにより調節することができます。ここでは、磁気共鳴画像法（MRI）プローブ、「鉄 - ケルセチン複合体」または鉄qの潜在的な使用を調査し、末梢血単核細胞（PBMC）を前処理して、血管新生細胞を拡大し、分泌された治療因子を強化しました。健康なドナーの血液から得られたPBMCは、鉄 - ケルセチン複合体の存在下で培養されました。分化した前処理PBMCは、免疫染色によって特徴付けられました。分泌されたサイトカインを記述するために、酵素結合免疫吸着アッセイを実施しました。血管新生の有効性を調査するために、ヒト臍静脈内皮細胞（HUVEC）を使用したin vitroの移動と尿細管形成が完了しました。鉄qは、造血様細胞のような細胞への単核前駆細胞の増殖と分化を有意に増加させ、造血および間質細胞マーカーの両方を発現させました。この拡張により、コロニー形成ユニット（CFU-Hill）の数が増加しました。鉄で処理したPBMCから得られた条件付き培地には、高レベルのインターロイキン8（IL-8）、IL-10、ウロキナーゼ型プラスミノゲン - 活性因子（UPA）、マトリックスメタロプロテイナーゼ-9（MMP-9）、および腫瘍壊死障害のアルファ（TNF-α）が含まれていました。Huvecsおよび線維芽細胞、in vitro。我々の研究は、IRONQを調整するPBMCプロトコルが、非可湿性PBMCの血管新生と補用の可能性を高めることができることを実証しました。このプロトコルは、虚血性疾患および慢性創傷にPBMCを使用する際の細胞療法の有効性を改善するための補助戦略として使用される場合があります。ただし、さらに検証するには、生体内評価が必要です。
細胞ベースの治療は、損傷した部位に移植されたときに組織を修復する能力により、虚血性疾患の非常に有望な治療パラダイムです。これらの治療効果には、局所微小環境に応じて分泌される高レベルの生物活性分子に起因する強力なパラクリン成分が含まれます。したがって、分泌された治療は、in vitro培養中に細胞を前処理することにより調節することができます。ここでは、磁気共鳴画像法（MRI）プローブ、「鉄 - ケルセチン複合体」または鉄qの潜在的な使用を調査し、末梢血単核細胞（PBMC）を前処理して、血管新生細胞を拡大し、分泌された治療因子を強化しました。健康なドナーの血液から得られたPBMCは、鉄 - ケルセチン複合体の存在下で培養されました。分化した前処理PBMCは、免疫染色によって特徴付けられました。分泌されたサイトカインを記述するために、酵素結合免疫吸着アッセイを実施しました。血管新生の有効性を調査するために、ヒト臍静脈内皮細胞（HUVEC）を使用したin vitroの移動と尿細管形成が完了しました。鉄qは、造血様細胞のような細胞への単核前駆細胞の増殖と分化を有意に増加させ、造血および間質細胞マーカーの両方を発現させました。この拡張により、コロニー形成ユニット（CFU-Hill）の数が増加しました。鉄で処理したPBMCから得られた条件付き培地には、高レベルのインターロイキン8（IL-8）、IL-10、ウロキナーゼ型プラスミノゲン - 活性因子（UPA）、マトリックスメタロプロテイナーゼ-9（MMP-9）、および腫瘍壊死障害のアルファ（TNF-α）が含まれていました。Huvecsおよび線維芽細胞、in vitro。我々の研究は、IRONQを調整するPBMCプロトコルが、非可湿性PBMCの血管新生と補用の可能性を高めることができることを実証しました。このプロトコルは、虚血性疾患および慢性創傷にPBMCを使用する際の細胞療法の有効性を改善するための補助戦略として使用される場合があります。ただし、さらに検証するには、生体内評価が必要です。
Cell-based therapy is a highly promising treatment paradigm in ischemic disease due to its ability to repair tissue when implanted into a damaged site. These therapeutic effects involve a strong paracrine component resulting from the high levels of bioactive molecules secreted in response to the local microenvironment. Therefore, the secreted therapeutic can be modulated by preconditioning the cells during in vitro culturing. Herein, we investigated the potential use of magnetic resonance imaging (MRI) probes, the "iron-quercetin complex" or IronQ, for preconditioning peripheral blood mononuclear cells (PBMCs) to expand proangiogenic cells and enhance their secreted therapeutic factors. PBMCs obtained from healthy donor blood were cultured in the presence of the iron-quercetin complex. Differentiated preconditioning PBMCs were characterized by immunostaining. An enzyme-linked immunosorbent assay was carried out to describe the secreted cytokines. In vitro migration and tubular formation using human umbilical vein endothelial cells (HUVECs) were completed to investigate the proangiogenic efficacy. IronQ significantly increased mononuclear progenitor cell proliferation and differentiation into spindle-shape-like cells, expressing both hematopoietic and stromal cell markers. The expansion increased the number of colony-forming units (CFU-Hill). The conditioned medium obtained from IronQ-treated PBMCs contained high levels of interleukin 8 (IL-8), IL-10, urokinase-type-plasminogen-activator (uPA), matrix metalloproteinases-9 (MMP-9), and tumor necrosis factor-alpha (TNF-α), as well as augmented migration and capillary network formation of HUVECs and fibroblast cells, in vitro. Our study demonstrated that the IronQ-preconditioning PBMC protocol could enhance the angiogenic and reparative potential of non-mobilized PBMCs. This protocol might be used as an adjunctive strategy to improve the efficacy of cell therapy when using PBMCs for ischemic diseases and chronic wounds. However, in vivo assessment is required for further validation.
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