養殖青色キツネの副腎皮質活動の指標としての糞便コルチゾール代謝産物

青いキツネの福祉研究は、視床下部 - 下垂体 - 副腎（HPA）軸活性を反映する非侵襲的な生理学的ストレスパラメーターとしての糞便コルチゾール代謝産物（FCM）の測定から恩恵を受けるでしょう。実装前に、そのような方法の種固有の検証が必要です。したがって、青色キツネのFCMを測定するために、酵素免疫測定法（EIA）の生理学的検証を実施しました。20人（9人の男性と11人の女性）に合成副腎皮質栄養栄養ホルモン（ACTH）を注射し、糞便サンプルに3時間ごとに2日間収集されました。FCMベースラインレベルは、最初のサンプリング日（制御期間、144サンプル）に基づいて評価され、その後ACTH注入とサンプリングの2日目（治療期間、122サンプル）が続きました。FCMは、5α-ペレグネン-3ß、11ß、21-トリオール-20-One EIAで分析されました。治療サンプルの推定平均FCM濃度をベースライン平均と比較しました。2つの期間のすべてのサンプルは、1日の同時に収集され、1時間ごとのペアワイズ比較でデータをテストすることができました。2つの統計的アプローチにより、FCM濃度の日中変動が結果の解釈に影響を与えたかどうかをテストしました。ベースラインレベルと比較して、両方のアプローチでは、ACTH注射後8〜14時間後にサンプリングされた時点で2.4〜3.2倍の濃度が示されました（P <0.05）。推定されたFCM濃度も、制御期間内にわずかに変動しました（P <0.01）。FCMレベルの個人間変動がマークされており、FCMを利用した実験に十分な数の動物を持つことの重要性を強調しています。3時間のサンプリング間隔により、有益なFCM曲線の形成が可能になりました。まとめると、この研究では、5α-ペレグナン-3ß、11ß、21-Triol-20-1つのEIAを用いたFCM分析は、栽培された青色キツネにおける副腎皮質活動の有効な測定であることが証明されています。したがって、種の将来の動物福祉研究では、非侵襲的ストレス指標として利用できます。

Welfare studies of blue foxes would benefit from a measurement of faecal cortisol metabolites (FCMs) as a non-invasive, physiological stress parameter reflecting hypothalamus-pituitary-adrenal (HPA) axis activity. Before implementation, a species-specific validation of such a method is required. Therefore, we conducted a physiological validation of an enzyme immunoassay (EIA) to measure FCMs in blue foxes. Twenty individuals (nine males and eleven females) were injected with synthetic adrenocorticotrophic hormone (ACTH) and faecal samples were collected every third h for two days. The FCM baseline levels were assessed based on the first sampling day (control period, 144 samples), followed by the ACTH injection and the second day of sampling (treatment period, 122 samples). FCMs were analysed with a 5α-pregnane-3ß,11ß,21-triol-20-one EIA. We compared the estimated mean FCM concentrations of the treatment samples to the baseline average. All samples for the two periods were collected at the same time of the day, which enabled to test the data also with an hourly pairwise comparison. With the two statistical approaches, we tested whether a possible diurnal fluctuation in the FCM concentrations affected the interpretation of the results. Compared to the baseline levels, both approaches showed 2.4-3.2 times higher concentrations on time points sampled 8-14 h after the ACTH injection (p < 0.05). The estimated FCM concentrations also fluctuated slightly within the control period (p < 0.01). Inter-individual variations in FCM levels were marked, which highlights the importance of having a sufficient number of animals in experiments utilising FCMs. The sampling intervals of 3 h enabled forming of informative FCM curves. Taken together, this study proves that FCM analysis with a 5α-pregnane-3ß,11ß,21-triol-20-one EIA is a valid measurement of adrenocortical activity in the farmed blue foxes. Therefore, it can be utilised as a non-invasive stress indicator in future animal welfare studies of the species.