組織培養培地におけるフェノールレッドは弱いエストロゲンです：培養におけるエストロゲン応答性細胞の研究に関する意味

培養中のホルモン応答性細胞に関する研究のために、血清からのホルモンの除去と血清を含まない培地の開発に多くの注意が払われていますが、培地コンポーネント自体がホルモン活性を持っている可能性についてはほとんど考慮されていません。いくつかの非ステロイド性エストロゲンに構造的に似ており、組織培地のpHインジケーターとして遍在的に使用されているフェノールレッドは、組織で発見された濃度（15-45マイクローム）で有意なエストロゲン活性を持っていることがわかりました。文化メディア。フェノールレッドは、エストラジオール（KD = 2 x 10（-5）m）の0.001％の親和性を持つMCF-7ヒト乳癌細胞のエストロゲン受容体に結合します。エストロゲン受容体陽性MCF-7乳癌細胞の量を用量依存的に刺激しますが、エストロゲン受容体陰性MDA-MB-231乳癌細胞の成長には影響しません。組織培養培地に存在する濃度では、フェノールレッドは部分的なエストロゲン性刺激を引き起こし、細胞数を200％に増加させ、プロゲステロン受容体含有量はフェノールレッドフリー培地で成長した細胞で見つかった300％になり、それによって外因性のエストロゲンがどの程度を減らします応答を刺激することができます。抗エストロゲンタモキシフェンとヒドロキシタモキシフェンは、フェノール赤の存在下で細胞が成長した場合にのみ、コントロールレベル以下の細胞増殖を阻害します。フェノールレッドがない場合、抗エストロゲンは成長を抑制しません。フェノール赤のエストロゲン活性は、培養中のエストロゲン応答性細胞を利用する研究で考慮すべきです。

Although much attention has been paid to the removal of hormones from sera and to the development of serum-free media for studies on hormone-responsive cells in culture, little consideration has been given to the possibility that the media components themselves may have hormonal activity. We have found that phenol red, which bears a structural resemblance to some nonsteroidal estrogens and which is used ubiquitously as a pH indicator in tissue culture media, has significant estrogenic activity at the concentrations (15-45 microM) at which it is found in tissue culture media. Phenol red binds to the estrogen receptor of MCF-7 human breast cancer cells with an affinity 0.001% that of estradiol (Kd = 2 X 10(-5) M). It stimulates the proliferation of estrogen receptor-positive MCF-7 breast cancer cells in a dose-dependent manner but has no effect on the growth of estrogen receptor-negative MDA-MB-231 breast cancer cells. At the concentrations present in tissue culture media, phenol red causes partial estrogenic stimulation, increasing cell number to 200% and progesterone receptor content to 300% of that found for cells grown in phenol red-free media, thereby reducing the degree to which exogenous estrogen is able to stimulate responses. The antiestrogens tamoxifen and hydroxytamoxifen inhibit cell proliferation below the control level only when cells are grown in the presence of phenol red; in the absence of phenol red, the antiestrogens do not suppress growth. The estrogenic activity of phenol red should be considered in any studies that utilize estrogen-responsive cells in culture.