モノクローナル抗体の部位固有の共有結合修飾：in vitroおよびin vivo評価

分子上の酸化オリゴ糖部分を利用するモノクローナル抗体の共有結合修飾のための戦略を評価し、より従来の方法と比較しました。定量的なin vitro測定によって判断されるように、オリゴ糖を介して調製されたモノクローナル抗体コンジュゲートは、均質な抗原結合特性と未修飾抗体の親和性を保持しました。対照的に、リジンまたはアスパラギン酸およびグルタミン酸側鎖のいずれかで同じ程度に修飾された同じ抗体の共役は、抗原結合が不均一であり、親和性が低下しました。in vivoの生体内分布および核イメージング実験は、2番目のモノクローナル抗体と腫瘍異種移植モデルでも実施されました。オリゴ糖で修飾された抗体は、ヨウ素-125で標識されたペプチドまたはインジウム11でキレート酸ジエチレントリアアミンペンタ酢酸のいずれかで、チロシンまたはライセインのいずれかで同じ抗体を放射標識した同じ抗体よりも効率的に標的腫瘍に局在します。これらの生体内では、従来の修飾抗体について文献で報告されている結果と比較した場合、モノクローナル抗体のオリゴ糖修飾は、コンジュゲートを調製する好ましい方法であることを示唆しています。

A strategy for covalent modification of monoclonal antibodies utilizing the oxidized oligosaccharide moieties on the molecule was evaluated and compared to more conventional methods. As judged by quantitative in vitro measurements, a monoclonal antibody conjugate prepared via the oligosaccharides retained the homogeneous antigen binding property and affinity of the unmodified antibody. In contrast, conjugates of the same antibody, modified to the same degree on either lysines or aspartic and glutamic acid side chains, were heterogeneous in their antigen binding and had lowered affinity. In vivo biodistribution and nuclear-imaging experiments were also performed with a second monoclonal antibody and a tumor xenograft model. Antibodies modified on the oligosaccharides with either a peptide labeled with iodine-125 or a diethylenetriaminepentaacetic acid chelate with indium-111 localize into target tumors more efficiently than the same antibody radiolabeled on either tyrosines or lysines. These in vivo results, when compared to those reported in the literature for conventionally modified antibodies, suggest that oligosaccharide modification of monoclonal antibodies is a preferred method of preparing conjugates.