標的行1でエンコードされたorf1pをターゲットとする自己抗体は、全身性エリテマトーデス診断に関連していますが、疾患活動性はありません

目的：長い散在する要素1（LINE-1）は、ヒトゲノムのかなりの部分を構成する内因性のレトロエレメントであり、全身性エリテマトーデス（SLE）の病因に関与しています。LINE-1 RNAシャペロンタンパク質ORF1Pは、最近SLE自己抗原として特定されました。ここでは、SLE自己抗原状態の根底にある品質についてORF1Pを分析し、抗ORF1P抗体をSLE疾患活動のマーカーと比較し、LINE-1逆転写酵素ORF2Pに対する抗体のスクリーニングを実施しました。 方法：ORF1Pは、細胞毒性リンパ球顆粒およびUV照射で処理した上皮細胞株で調べました。抗ORF1Pおよび抗ORF2P抗体をELISAによってアッセイし、2つのSLEコホートで分析しました。 結果：Orf1pはアポトーシス細胞における細胞質RNA含有BLEBに局在し、細胞毒性プロテアーゼグランザイムB（GRB）の基質であることがわかりました。2つのSLEコホートの被験者の15.8％（P = 0.0157）および15.5％（P = 0.036）と比較して、抗ORF1P抗体は健康なコントロールの4.2％に存在していました。抗ORF1P抗体は、SLE疾患活動性やインターフェロン（IFN）活性化の末梢血マーカーと関連していませんでした。抗ORF1Pの力価は、シリアル時点で安定性を示しました。抗ORF1P抗体は、抗DNA、抗RNP、または他のSLE自己抗体と関連していませんでした。抗ORF2P ELISAの結果に違いはありませんでした。 結論：LINE-1 ORF1Pは、アポトーシスブレブの成分であり、GRBの基質です。抗ORF1P抗体はSLE被験者に濃縮されていますが、疾患活動性の動的マーカーとは関連していません。これらのデータは、SLEの病因におけるLINE-1調節不全の潜在的な役割をサポートしています。

OBJECTIVES: Long Interspersed Element 1 (LINE-1) is an endogenous retroelement that constitutes a significant portion of the human genome and has been implicated in the pathogenesis of systemic lupus erythematosus (SLE). The LINE-1 RNA chaperone protein ORF1p was recently identified as an SLE autoantigen. Here we analyse ORF1p for qualities underlying SLE autoantigen status, compared anti-ORF1p antibodies to markers of SLE disease activity, and performed screening for antibodies against LINE-1 reverse transcriptase ORF2p. METHODS: ORF1p was examined in epithelial cell lines treated with cytotoxic lymphocyte granules and UV irradiation. Anti-ORF1p and anti-ORF2p antibodies were assayed by ELISA and analysed in two SLE cohorts. RESULTS: We found that ORF1p localises to cytoplasmic RNA-containing blebs in apoptotic cells, and is a substrate of the cytotoxic protease granzyme B (GrB). Anti-ORF1p antibodies were present in 4.2% of healthy controls, compared to 15.8% (p=0.0157) and 15.5% (p=0.036) of subjects in the two SLE cohorts. Anti-ORF1p antibodies were not associated with SLE disease activity nor peripheral blood markers of interferon (IFN) activation. Anti-ORF1p titres demonstrated stability over serial time points. Anti-ORF1p antibodies were not associated with anti-DNA, anti-RNP, or other SLE autoantibodies. There was no difference in anti-ORF2p ELISA results in controls versus SLE patients. CONCLUSIONS: LINE-1 ORF1p is a component of apoptotic blebs and a substrate for GrB. Anti-ORF1p antibodies are enriched in SLE subjects but are not associated with dynamic markers of disease activity. These data support a potential role for LINE-1 dysregulation in SLE pathogenesis.