IPSC由来の胸腺上皮細胞と共培養されたHSC濃縮BMCからのγδT細胞の誘導

γδ抗原受容体を持つT細胞は、悪性腫瘍を含むいくつかの疾患の潜在的な治療として調査されています。しかし、γδT細胞の臨床適用は、in vivoの比較的低い存在量と、in vitroで造血幹細胞（HSC）からの分化を誘導するという技術的な困難によって妨げられています。ここでは、誘導された多能性幹細胞（IPSC）に由来する誘導胸腺上皮細胞（ITECS）と共培養するHSC骨骨髄細胞（HSC-EBMC）を共培養することにより、マウスγδT細胞を生成するための新しい方法を説明します。CD45.1コンジェニックC57BL/6マウスのBMCを使用して、CD45.2を発現したiPSCと区別しました。VγおよびVΔT細胞受容体の広範なレパートリーを発現する最大21日間のCD45.1 +γδT細胞を最大21日間誘導したHSC-EBMCおよびITECが培養されたことを示しました。特に、誘導リンパ球には、αβT細胞、NK1.1+天然キラー細胞、またはB220+ B細胞がほとんどまたはまったく含まれていませんでした。誘導したγδT細胞の白血病を含むマウスへの養子移植は、腫瘍の成長を有意に減少させ、腫瘍形成や自己免疫疾患などの明らかな副作用はありませんでした。この新しい方法は、臨床応用のためにヒトγδT細胞を生産するためにも使用できることを示唆しています。

T cells bearing γδ antigen receptors have been investigated as potential treatments for several diseases, including malignant tumours. However, the clinical application of γδT cells has been hampered by their relatively low abundance in vivo and the technical difficulty of inducing their differentiation from hematopoietic stem cells (HSCs) in vitro. Here, we describe a novel method for generating mouse γδT cells by co-culturing HSC-enriched bone marrow cells (HSC-eBMCs) with induced thymic epithelial cells (iTECs) derived from induced pluripotent stem cells (iPSCs). We used BMCs from CD45.1 congenic C57BL/6 mice to distinguish them from iPSCs, which expressed CD45.2. We showed that HSC-eBMCs and iTECs cultured with IL-2 + IL-7 for up to 21 days induced CD45.1+ γδT cells that expressed a broad repertoire of Vγ and Vδ T-cell receptors. Notably, the induced lymphocytes contained few or no αβT cells, NK1.1+ natural killer cells, or B220+ B cells. Adoptive transfer of the induced γδT cells to leukemia-bearing mice significantly reduced tumour growth and prolonged mouse survival with no obvious side effects, such as tumorigenesis and autoimmune diseases. This new method suggests that it could also be used to produce human γδT cells for clinical applications.