ファルネソイドX受容体（FXR）は、マウスにおける肝抗トロンビンIII発現を誘導することにより、凝固プロセスを阻害します

ファルネソイドX受容体（FXR）は、血小板機能の阻害剤およびフィブリノーゲンタンパク質複合体の誘導剤として同定されています。ただし、止血系におけるFXRの調節メカニズムは不完全に理解されたままです。この研究では、アンチトロンビンIIIの調節におけるFXRの機能を調査することを目指しました（III）。C57BL/6マウスとFXRノックアウト（FXR KO）マウスは、GW4064（1日あたり30 mg/kg）で治療されました。FXRの活性化は、プロトロンビン時間（PT）を有意に延長し、部分的なトロンボプラチン時間（APTT）を活性化し、活性化因子X（FXA）の活性を低下させ、トロンビンアンチスロンビン複合体（TAT）および活性化因子II（FIIA）の濃度、およびATレベルの増加レベルの増加III、一方、これらの効果はすべて、FXR KOマウスで著しく逆転しました。in vivoでは、III mRNAおよびタンパク質発現レベルでの肝臓は、FXR活性化後の野生型マウスでは上方制御されましたが、FXR KOマウスではダウンレギュレートされました。in vitro研究では、FXRの活性化が誘発され、FXRノックダウンが阻害され、マウス一次肝細胞でのIII発現で阻害されることが示されました。ルシフェラーゼアッセイとチップアッセイにより、FXRはIII遺伝子のプロモーター領域に結合できることが明らかになり、III転写でFXR活性化が増加しました。これらの結果は、FXRの活性化が、マウスのIII発現で肝臓を誘導することにより凝固プロセスを阻害することを示唆しています。本研究は、止血性恒常性におけるFXRの新しい役割を明らかにし、FXRが高凝固に関連する疾患の潜在的な治療標的として作用する可能性があることを示しています。

Farnesoid X receptor (FXR) has been identified as an inhibitor of platelet function and an inducer of fibrinogen protein complex. However, the regulatory mechanism of FXR in hemostatic system remains incompletely understood. In this study, we aimed to investigate the functions of FXR in regulating antithrombin III (AT III). C57BL/6 mice and FXR knockout (FXR KO) mice were treated with or without GW4064 (30 mg/kg per day). FXR activation significantly prolonged prothrombin time (PT) and activated partial thromboplastin time (APTT), lowered activity of activated factor X (FXa) and concentrations of thrombin-antithrombin complex (TAT) and activated factor II (FIIa), and increased level of AT III, whereas all of these effects were markedly reversed in FXR KO mice. In vivo, hepatic AT III mRNA and protein expression levels were up-regulated in wild-type mice after FXR activation, but down-regulated in FXR KO mice. In vitro study showed that FXR activation induced, while FXR knockdown inhibited, AT III expression in mouse primary hepatocytes. The luciferase assay and ChIP assay revealed that FXR can bind to the promoter region of AT III gene where FXR activation increased AT III transcription. These results suggest FXR activation inhibits coagulation process via inducing hepatic AT III expression in mice. The present study reveals a new role of FXR in hemostatic homeostasis and indicates that FXR might act as a potential therapeutic target for diseases related to hypercoagulation.