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Viruses2021Oct30Vol.13issue(11)

真核生物翻訳伸長因子1A(EEF1A)のアイソフォームは、ニコチアナ・ベンサミアナのトマト斑点のあるウィルトウイルス疾患に必要な副駆動因子として作用します

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文献タイプ:
  • Journal Article
  • Research Support, Non-U.S. Gov't
概要
Abstract

陰性鎖RNAウイルストマトの三才ゲノムは、2つのウイルスタンパク質、RNA依存性RNAポリメラーゼ、2つのウイルスタンパク質とともに、感染性リボヌクレタンパク質複合体(RNP)(RNP)とともに組み立てられます。これらの2つのウイルスタンパク質は、ウイルスの複製と転写に不可欠ですが、これら2つのプロセスをサポートする宿主要因に関する知識は限られたままです。この知識のギャップを埋めるために、TSWVに感染したニコティアナ・ベンサミアナ植物から収集されたウイルスRNPのタンパク質組成、および酵母Saccharomyces cerevisiaeの再構成されたTSWVレプリコンシステムから収集されたものを分析しました。感染した植物材料から得られたRNPは、(i)糖およびリン酸輸送、および(ii)細胞ストレスに対する反応に関係する植物タンパク質のために濃縮されました。対照的に、酵母由来のウイルスRNPは、主にRNA処理とリボソーム生合成に関与したタンパク質を含んでいた。後者は、酵母では、翻訳機械がこれらのウイルスRNPに採用されていることを示唆しています。これらの細胞タンパク質のいずれかがTSWV感染に重要であるかどうかを調べるために、対応するN. benthamiana遺伝子はウイルス誘発遺伝子サイレンシングの標的となり、その後、これらの植物はTSWVで挑戦されました。このアプローチは、TSWVの全身拡散と病気の症状の発生に重要な4つの宿主因子を明らかにしました。

陰性鎖RNAウイルストマトの三才ゲノムは、2つのウイルスタンパク質、RNA依存性RNAポリメラーゼ、2つのウイルスタンパク質とともに、感染性リボヌクレタンパク質複合体(RNP)(RNP)とともに組み立てられます。これらの2つのウイルスタンパク質は、ウイルスの複製と転写に不可欠ですが、これら2つのプロセスをサポートする宿主要因に関する知識は限られたままです。この知識のギャップを埋めるために、TSWVに感染したニコティアナ・ベンサミアナ植物から収集されたウイルスRNPのタンパク質組成、および酵母Saccharomyces cerevisiaeの再構成されたTSWVレプリコンシステムから収集されたものを分析しました。感染した植物材料から得られたRNPは、(i)糖およびリン酸輸送、および(ii)細胞ストレスに対する反応に関係する植物タンパク質のために濃縮されました。対照的に、酵母由来のウイルスRNPは、主にRNA処理とリボソーム生合成に関与したタンパク質を含んでいた。後者は、酵母では、翻訳機械がこれらのウイルスRNPに採用されていることを示唆しています。これらの細胞タンパク質のいずれかがTSWV感染に重要であるかどうかを調べるために、対応するN. benthamiana遺伝子はウイルス誘発遺伝子サイレンシングの標的となり、その後、これらの植物はTSWVで挑戦されました。このアプローチは、TSWVの全身拡散と病気の症状の発生に重要な4つの宿主因子を明らかにしました。

The tripartite genome of the negative-stranded RNA virus Tomato spotted wilt orthotospovirus (TSWV) is assembled, together with two viral proteins, the nucleocapsid protein and the RNA-dependent RNA polymerase, into infectious ribonucleoprotein complexes (RNPs). These two viral proteins are, together, essential for viral replication and transcription, yet our knowledge on the host factors supporting these two processes remains limited. To fill this knowledge gap, the protein composition of viral RNPs collected from TSWV-infected Nicotiana benthamiana plants, and of those collected from a reconstituted TSWV replicon system in the yeast Saccharomyces cerevisiae, was analysed. RNPs obtained from infected plant material were enriched for plant proteins implicated in (i) sugar and phosphate transport and (ii) responses to cellular stress. In contrast, the yeast-derived viral RNPs primarily contained proteins implicated in RNA processing and ribosome biogenesis. The latter suggests that, in yeast, the translational machinery is recruited to these viral RNPs. To examine whether one of these cellular proteins is important for a TSWV infection, the corresponding N. benthamiana genes were targeted for virus-induced gene silencing, and these plants were subsequently challenged with TSWV. This approach revealed four host factors that are important for systemic spread of TSWV and disease symptom development.

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