IL-2の精製およびアッセイのためのモノクローナル抗体

組換えヒトインターロイキン-2（REC IL-2）に対して上昇したマウスモノクローナル抗体（MAC 002およびMAC 003）は、アッセイおよび精製試薬として使用するために開発されました。免疫拡張法では、（IRMA）、125i-MAC 002がトレーサーとして使用され、固相にヒツジポリクローナル抗REC IL-2があります。これは、3〜1000 ng/mlの範囲でRec IL-2を確実に測定します。アッセイは、感度が低い自然IL-2を測定します。IL-2の一部のサンプルでは、​​IRMAによって検出された量は、おそらく抗原性を持つが生物学的活性を持つIL-2分子があるため、生物学的アッセイから予想よりも大きい。これは、IL-2の異なる準備で観察される特定の活動の変動の原因です。精製試薬では、MAC 003はセファロースCL-4Bに固定され、組換えIL-2を大腸菌抽出物の1％未満から90％未満の純度に精製し、80％を超える収量を超える単一のステップで精製します。

Mouse monoclonal antibodies (Mac 002 and Mac 003) raised against recombinant human Interleukin-2 (rec IL-2), were developed for use as assay and purification reagents. In the Immunoradiometric assay, (IRMA), 125I-Mac 002 is used as tracer, with sheep polyclonal anti-rec IL-2 on the solid phase. This reliably measures rec IL-2 in the range 3-1000 ng/ml. The assay measures natural IL-2 with a lower sensitivity. For some samples of IL-2, the amount detected by IRMA is greater than expected from the biological assays, presumably because there are IL-2 molecules with antigenic, but not biological activity. This is a possible source of variation in the specific activities observed in different preparations of of IL-2. In the purification reagent, Mac 003 is immobilised on sepharose CL-4B to purify recombinant IL-2 from less than 1% in an E. Coli extract, to greater than 90% purity, in a single step with greater than 80% yield.