マウスTリンパ腫細胞からのフォドリンを含む膜貫通複合体のさらなる特性評価

フォドリン（アクチン結合タンパク質）と主要な表面糖タンパク質（GP 180）を含む膜貫通複合体は、非イオン性界面活性剤抽出およびスクロース勾配遠心分離の相補的技術により、マウスTリンパ腫細胞から以前に分離されました（Bourguignon et（bourguignon et）1985）J。Cell Biol。この複合体の分析は拡張され、構造関連を検証し、フォドリンとGP 180の間の相互作用をさらに定義しています。フォドリンとGP 180の関連性は、次の証拠によって確認されています。20秒の堆積係数を持つショ糖勾配のピーク。20秒のピーク全体にわたるフォドリンとGP 180の一定の比率。抗フォドリン抗体を使用して、20秒のピークからのFodrinを使用したGP 180の特定の共沈着。免疫電子顕微鏡技術を使用したアクチンフィラメントの20秒のピークからのフォドリンとGP 180の共局在。さらに、このFodrin-GP 180複合体は、それぞれ0.6 M NaClの存在下と非存在下で容易に解離し、再組み立てされる可能性があります。このFodrin-GP 180複合体がアクチン結合能力を示しているという事実は、この膜貫通複合体がリンパ球のパッチングとキャッピング中の受容体と細胞骨格間のリンクイベントで重要な役割を果たす可能性があることを示しています。

A transmembrane complex containing fodrin (an actin-binding protein) and a major surface glycoprotein (GP 180) was previously isolated from mouse T-lymphoma cells by the complementary techniques of non-ionic detergent extraction and sucrose gradient centrifugation (Bourguignon et al. (1985) J. Cell Biol. 101, 477-487). The analysis of this complex has been extended to verify the structural association and further define the interaction between fodrin and GP 180. The association between fodrin and GP 180 has been confirmed by the following evidence: co-sedimentation of fodrin and GP 180 in a single peak on a sucrose gradient with a sedimentation coefficient of 20 S; a constant ratio of fodrin and GP 180 across the 20 S peak; the specific co-precipitation of GP 180 with fodrin from the 20 S peak using anti-fodrin antibody; and the colocalization of fodrin and GP 180 from the 20 S peak on actin filaments using an immuno-electron microscopic technique. Furthermore, this fodrin-GP 180 complex can be readily dissociated and reassembled in the presence and absence of 0.6 M NaCl, respectively. The fact that this fodrin-GP 180 complex displays actin-binding ability indicates that this transmembrane complex may play an important role in the linking event between receptors and the cytoskeleton during lymphocyte patching and capping.