非アルコール性脂肪肝疾患を伴うマウスの脂肪組織由来間質細胞の特性評価と肝臓の修復への使用

はじめに：比較的豊富な間葉系幹細胞のようなその他の細胞を含む、新しく分離された培養されていない脂肪組織由来間質細胞（U-ADSC）は、修復および再生療法に魅力的です。ただし、疾患の影響を受けた宿主から得られたU-ADSCの詳細な特性と治療効果は不明です。野生型マウスから得られたU-ADSCの特性と、非アルコール性脂肪性肝炎（NASH）のマウスモデルから比較しました。 方法：NASHモデルは、C57BL/6Jマウスに4（NASH（4W））または12週間（NASH（12W））のアテローム生成高脂肪食を供給し、続いてU-ADSCの分離と特性評価によって確立されました。野生型U-ADSCまたはNASH由来のU-ADSCをナッシュ肝硬変のマウスに投与し、その後、肝炎症細胞、抗原プロファイル、線維症、および遺伝子発現の分析を行いました。 結果：野生型U-ADSCおよびNASH由来のU-ADSCは、表面抗原プロファイルに著しい違いを示しませんでした。NASH（4W）U-ADSCでは、NASH（12W）U-ADSCではなく、白血球マーカーCD11B、CD45、およびCD44の周波数が上昇しました。さらに、NASH（12W）U-ADSCでのみM1/M2マクロファージ比の増加が観察されました。NASH-4W U-ADSCでのみ、発現レベルの細胞周期関連遺伝子はU-ADSCの遺伝子よりも高かった。NASH関連肝硬変のマウスに投与された野生型U-ADSCは、CD11b+、F4/80+、およびGR-1+炎症細胞の浸潤を減少させ、遺伝子発現によって決定されるように、肝臓組織に修復的効果があり、肝臓組織に回復効果がありました。プロファイルとNAFLDアクティビティスコア。NASH関連の肝硬変に対するNASH（4W）U-ADSCおよびNASH（12W）U-ADSCの治療効果は、炎症や線維症の減少を含む野生型U-ADSCの効果と非常に類似していた。 結論：野生型U-ADSCと同様のNASH由来のU-ADSCは、NASHを伴うマウスの補償および再生療法に適用できます。

INTRODUCTION: Freshly isolated uncultured adipose tissue-derived stromal cells (u-ADSCs), containing miscellaneous cells like the relatively abundant mesenchymal stem cells, are attractive for repair and regenerative therapy. However, the detailed characteristics and therapeutic efficacy of u-ADSCs obtained from disease-affected hosts are unknown. We compared the properties of u-ADSCs obtained from wild-type mice and from a mouse model of non-alcoholic steatohepatitis (NASH). METHODS: The NASH model was established by feeding C57BL/6J mice an atherogenic high-fat diet for 4 (NASH (4w)) or 12 weeks (NASH (12w)), followed by the isolation and characterization of u-ADSCs. Wild-type u-ADSCs or NASH-derived u-ADSCs were administered to mice with NASH cirrhosis, followed by analyses of hepatic inflammatory cells, antigen profiles, fibrosis, and gene expression. RESULTS: Wild-type u-ADSCs and NASH-derived u-ADSCs did not show marked differences in surface antigen profiles. In NASH (4w) u-ADSCs, but not NASH (12w) u-ADSCs, the frequencies of the leukocyte markers CD11b, CD45, and CD44 were elevated; furthermore, we observed an increase in the M1/M2 macrophage ratio only in NASH (12w) u-ADSCs. Only in NASH-4w u-ADSCs, the expression levels cell cycle-related genes were higher than those in u-ADSCs. Wild-type u-ADSCs administered to mice with NASH-related cirrhosis decreased the infiltration of CD11b+, F4/80+, and Gr-1+ inflammatory cells, ameliorated fibrosis, and had a restorative effect on liver tissues, as determined by gene expression profiles and the NAFLD activity score. The therapeutic effects of NASH (4w) u-ADSCs and NASH (12w) u-ADSCs on NASH-related cirrhosis were highly similar to the effect of wild-type u-ADSCs, including reductions in inflammation and fibrosis. CONCLUSIONS: NASH-derived u-ADSCs, similar to wild-type u-ADSCs, are applicable for reparative and regenerative therapy in mice with NASH.