C型レクチン受容体ランゲリンを介して、ヒト皮膚のランゲルハンス細胞へのワクチンタンパク質の標的送達

ヒト皮膚は、病原体を認識する異なるC型レクチン受容体（CLR）を示す複数の樹状細胞（DC）サブセットを抱えるため、好ましいワクチン接種部位です。抗原を抗体またはリガンドによってCLRに送達して、抗原特異的免疫応答を高めることができます。この概念はマウスモデルで確立されていますが、その場でのヒト皮膚DCへの抗原送達の機能的結果に関する詳細な洞察はまばらです。この研究では、EBV核抗原1（EBNA1）に結合した抗ヒトランゲリン抗体をクローン化して生産しました。抗ランジェリンEBNA1のランゲルハンス細胞（LC）への特定の結合を確認しました。次に、この新規LCベースのワクチンを、既存の抗DEC-205-EBNA1融合タンパク質と比較して、LCを表皮細胞懸濁液にロードしてから、自家T細胞と共培養しました。EBNA1-ペプチドで再刺激した後、両方のワクチンを含むIFN-γ-およびTNF-α陽性CD4+ T細胞のレベルの上昇を検出しました。融合タンパク質を皮内にヒト皮膚外植片に注入すると、T細胞による205年12月誘発サイトカイン産生を介して標的となった皮膚DCを移動しましたが、ランゲリンベースのワクチンはそうしませんでした。要約すると、皮膚を介した抗体標的アプローチが有望なワクチン接種戦略であることを実証しますが、強力な免疫応答を誘導するにはワクチンのさらなる最適化が必要です。

Human skin is a preferred vaccination site as it harbors multiple dendritic cell (DC) subsets, which display distinct C-type lectin receptors (CLR) that recognize pathogens. Antigens can be delivered to CLR by antibodies or ligands to boost antigen-specific immune responses. This concept has been established in mouse models but detailed insights into the functional consequences of antigen delivery to human skin DC in situ are sparse. In this study, we cloned and produced an anti-human Langerin antibody conjugated to the EBV nuclear antigen 1 (EBNA1). We confirmed specific binding of anti-Langerin-EBNA1 to Langerhans cells (LC). This novel LC-based vaccine was then compared to an existing anti-DEC-205-EBNA1 fusion protein by loading LC in epidermal cell suspensions before coculturing them with autologous T cells. After restimulation with EBNA1-peptides, we detected elevated levels of IFN-γ- and TNF-α-positive CD4+ T cells with both vaccines. When we injected the fusion proteins intradermally into human skin explants, emigrated skin DC targeted via DEC-205-induced cytokine production by T cells, whereas the Langerin-based vaccine failed to do so. In summary, we demonstrate that antibody-targeting approaches via the skin are promising vaccination strategies, however, further optimizations of vaccines are required to induce potent immune responses.