ブルサトールは、SKP1を標的として癌の成長と転移を阻害することにより、非小細胞肺癌において治療効果があります

SKP1-CUL1-F-BOXタンパク質（SCF）ユビキチンE3リガーゼは、がん発症に重要な役割を果たし、癌療法の有望な治療標的として機能します。既知のNRF2阻害剤であるブルサトール（BRU）は、広範囲の腫瘍を治療することを約束しています。ただし、BRUの直接的なターゲットとその抗がん剤の作用モードは不明のままです。私たちの研究では、793のBRU結合候補タンパク質が、ビオチン - ブルサトールコンジュゲート（BIO-BRU）を使用して同定され、その後、ストレプトアビジンアフィニティプルダウンベースの質量分析が続きました。BRUはSKP1に直接結合し、SKP1とF-Boxタンパク質SKP2との相互作用を破壊し、SKP2-SCF E3リガーゼの阻害につながることがわかりました。BRUは、基質P27およびE-カドヘリンの蓄積を促進することにより、増殖と移動の両方を阻害しました。SKP1の過剰発現は減衰し、SKP1ノックダウンは非小細胞肺癌（NSCLC）細胞におけるBRUのこれらの効果を高めました。さらに、SKP1へのBRU結合は、β-TRCP-SCF E3リガーゼも阻害しました。皮下および同所性NSCLC異種移植片の両方で、BRUはSCF複合体を標的とし、P27およびE-カドヘリンタンパク質レベルを上方制御することにより、NSCLCの成長と転移を著しく阻害しました。これらのデータは、BRUがSKP1ターゲティング剤であり、肺がんの治療用可能性を有する可能性があることを示しています。

Skp1-Cul1-F-box protein (SCF) ubiquitin E3 ligases play important roles in cancer development and serve as a promising therapeutic target in cancer therapy. Brusatol (Bru), a known Nrf2 inhibitor, holds promise for treating a wide range of tumors; however, the direct targets of Bru and its anticancer mode of action remain unclear. In our study, 793 Bru-binding candidate proteins were identified by using a biotin-brusatol conjugate (Bio-Bru) followed by streptavidin-affinity pull down-based mass spectrometry. We found that Bru can directly bind to Skp1 and disrupt the interactions of Skp1 with the F-box protein Skp2, leading to the inhibition of the Skp2-SCF E3 ligase. Bru inhibited both proliferation and migration via promoting the accumulation of the substrates p27 and E-cadherin; Skp1 overexpression attenuated while Skp1 knockdown enhanced these effects of Bru in non-small cell lung cancer (NSCLC) cells. Moreover, Bru binding to Skp1 also inhibited the β-TRCP-SCF E3 ligase. In both subcutaneous and orthotopic NSCLC xenografts, Bru significantly inhibited the growth and metastasis of NSCLC through targeting SCF complex and upregulating p27 and E-cadherin protein levels. These data demonstrate that Bru is a Skp1-targeting agent that may have therapeutic potentials in lung cancer.