EGFRを介した光免疫療法による抗GBM免疫応答を引き起こします

背景：外科的切除とそれに続く化学療法放射線は、膠芽腫（GBM）の進行を延期し、患者の生存を延長しますが、これらの腫瘍は最終的に再発します。腫瘍切除を最大化する術中技術と治療法を組み合わせたマルチモーダル治療計画は、免疫学的にコールドGBM微小環境を改造することを目的としています。ここでは、標的を絞った光免疫療法（PIT）が腫瘍の位置と縁を定義するだけでなく、抗GBM T細胞応答の活性化をさらに促進することを報告します。 方法：EGFR特異的アフィボイブ分子（ZEGFR：03115）をIR700に共役しました。ZEGFRに対する応答：03115-IR700-PITは、in vitroおよびin vivoでGBM細胞株および異種移植モデルで調査されました。腫瘍特異的免疫応答後の腫瘍を決定するために、合成GBMモデルが使用されました。 結果：in vitro所見により、Zegfr：03115-IR700が光照射時に活性酸素種を生成する能力が確認されました。ZEGFR：03115-IR700-PITは、損傷関連分子パターン（DAMP）の放出をトリガーした免疫原性細胞死を促進しました。in vivoでは、照射後1時間後には、脳腫瘍で光活性化コンジュゲートに対する治療反応が観察されました。脳切片の染色では、MRI T2*Wの獲得を裏付けたピット処理腫瘍内の細胞増殖、腫瘍壊死、および微小血中出血が減少しました。さらに、ピット後の免疫応答の強化は、マウスGBM脳腫瘍を有するマウスのT細胞の魅力と活性化をもたらしました。 結論：我々のデータは、EGFR陽性脳腫瘍を正確に視覚化し、結合後の照射後の腫瘍細胞を破壊するZEGFR：03115-IR700の可能性を強調し、免疫抑制腫瘍環境を免疫障害のあるものに変えます。

BACKGROUND: Surgical resection followed by chemo-radiation postpones glioblastoma (GBM) progression and extends patient survival, but these tumours eventually recur. Multimodal treatment plans combining intraoperative techniques that maximise tumour excision with therapies aiming to remodel the immunologically cold GBM microenvironment could improve patients' outcomes. Herein, we report that targeted photoimmunotherapy (PIT) not only helps to define tumour location and margins but additionally promotes activation of anti-GBM T cell response. METHODS: EGFR-specific affibody molecule (ZEGFR:03115) was conjugated to IR700. The response to ZEGFR:03115-IR700-PIT was investigated in vitro and in vivo in GBM cell lines and xenograft model. To determine the tumour-specific immune response post-PIT, a syngeneic GBM model was used. RESULTS: In vitro findings confirmed the ability of ZEGFR:03115-IR700 to produce reactive oxygen species upon light irradiation. ZEGFR:03115-IR700-PIT promoted immunogenic cell death that triggered the release of damage-associated molecular patterns (DAMPs) (calreticulin, ATP, HSP70/90, and HMGB1) into the medium, leading to dendritic cell maturation. In vivo, therapeutic response to light-activated conjugate was observed in brain tumours as early as 1 h post-irradiation. Staining of the brain sections showed reduced cell proliferation, tumour necrosis, and microhaemorrhage within PIT-treated tumours that corroborated MRI T2*w acquisitions. Additionally, enhanced immunological response post-PIT resulted in the attraction and activation of T cells in mice bearing murine GBM brain tumours. CONCLUSIONS: Our data underline the potential of ZEGFR:03115-IR700 to accurately visualise EGFR-positive brain tumours and to destroy tumour cells post-conjugate irradiation turning an immunosuppressive tumour environment into an immune-vulnerable one.