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全血中の亜鉛プロトポルフィリン（ZNPP）とプロトポルフィリン（PP）の測定のために、高性能液体クロマトグラフィー（HPLC）メソッドが開発されました。酢酸に血液を添加した後、ZNPPとPPを、内部標準としてメソポルフィリンを含むジメチルスルホキシド - アセトンで抽出しました。アセトンの蒸発後、ヘミンを含まない抽出物をHPLCによって分析しました。ZNPPとPPは、逆相カラムで分離され、蛍光ピーク領域を測定することにより定量化されました。抽出方法は単純で、バッチ分析に適用でき、HPLCの分離は迅速かつ繰り返し可能です。ZNPPの変動係数は、それぞれ1リットルRBCあたり3.5および10.2 Mumolの総赤細胞ポルフィリンレベルで5.6％および3.3％でした。結果は、紅斑性プロトポルフィリア、鉛曝露、鉄欠損、および非特異的に赤血球ポルフィリンの上昇を有する患者で議論されています。
全血中の亜鉛プロトポルフィリン（ZNPP）とプロトポルフィリン（PP）の測定のために、高性能液体クロマトグラフィー（HPLC）メソッドが開発されました。酢酸に血液を添加した後、ZNPPとPPを、内部標準としてメソポルフィリンを含むジメチルスルホキシド - アセトンで抽出しました。アセトンの蒸発後、ヘミンを含まない抽出物をHPLCによって分析しました。ZNPPとPPは、逆相カラムで分離され、蛍光ピーク領域を測定することにより定量化されました。抽出方法は単純で、バッチ分析に適用でき、HPLCの分離は迅速かつ繰り返し可能です。ZNPPの変動係数は、それぞれ1リットルRBCあたり3.5および10.2 Mumolの総赤細胞ポルフィリンレベルで5.6％および3.3％でした。結果は、紅斑性プロトポルフィリア、鉛曝露、鉄欠損、および非特異的に赤血球ポルフィリンの上昇を有する患者で議論されています。
A high performance liquid chromatographic (HPLC) method was developed for the determination of zinc protoporphyrin (ZnPP) and protoporphyrin (PP) in whole blood. After adding the blood to dilute acetic acid, ZnPP and PP were extracted with dimethyl sulfoxide-acetone containing mesoporphyrin as internal standard. Following evaporation of the acetone, the haemin-free extract was analysed by HPLC. ZnPP and PP were separated on a reversed-phase column and quantitated by measuring fluorescence peak areas. The extraction method is simple, and applicable to batch analysis, and the HPLC separation is rapid and repoducible. The coefficient of variation for ZnPP was 5.6% and 3.3% for total red cell porphyrin levels of 3.5 and 10.2 mumol per litre RBC respectively. Results are discussed in patients with erythrohepatic protoporphyria, lead exposure, iron-deficiency and nonspecifically elevated total red cell porphyrins.
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